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白木香叶代泡茶的质量标准研究
[摘要] 目的 初步建立白木香叶代泡茶的质量标准。 方法 采用理化鉴别(滤纸层析预试法),薄层色谱法(TLC)对白木香叶代泡茶进行真伪鉴别、采用高效液相色谱法(HPLC)测定白木香叶代泡茶中的总黄酮含量等实验手段,对白木香叶代泡茶的质量标准进行系统研究。 结果 定性方法的结果与预期结果相符。定量的结果,测得白木香叶代泡茶中的总黄酮含量为:0.1502%(n = 5),RSD%=1.44%,平均回收率98.15%,RSD%=0.74%。建立的定性及定量方法,简单可行、重复性好,能有效地控制白木香叶代泡茶的质量。 结论 建立白木香叶代泡茶的质量标准,为用药安全和开发利用该药用植物资源提供科学依据。
[关键词] 理化鉴别;薄层色谱法;高效液相色谱法;质量标准
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)10(b)-0105-03
沉香为瑞香科植物白木香Aquilafia sinensis,(Lour.)Gilg含有树脂的木材,为广东著名的地产药材。沉香具有行气止痛、温中止呕、纳气平喘等功效,用于胸腹胀闷疼痛、胃寒呕吐呃逆、肾虚气逆喘急[1]。白木香叶为白木香的非药用部位,吴秀荣等[2]、李红念等[3]、林焕泽等[4]、Minhua等[5]、林芳花等[6]采用白木香叶提取物和沉香药材做了一系列的对比试验,发现白木香叶提取物具有沉香功效的一些相同的特点,如抗炎、镇痛、降糖、平喘、抗氧化、延缓衰老作用等功效,而且效果显著。而白木香叶代泡茶是由白木香叶粉碎成粗粒,配以甘草等药材,研制成的饮用茶,其具有降气温中、暖肾纳气、治肝郁、降肝气、和脾胃、消湿气、利水开窍等功效,而且降糖、降脂、益气益精、助睡眠、饮用方便,效果显著。白木香叶代泡茶的保健效果已有相关研究[7],而关于白木香叶代泡茶质量标准方面的研究,国内外均无报道,为此,笔者根据其功效对其中可能含有的主要成分设计了定性鉴别,并对其中所含的黄酮含量进行了测定,以期为白木香叶代泡茶质量标准的制定提供参考。
1 仪器与试药
1.1 主要仪器
岛津LC-20A高效液相色谱仪,LC-20AT高压泵,SPD-M20A检测器,CBM-20A系统控制器,SIL-20A自动进样器,TU-1901型紫外可见分光光度计,KQ-500型超声波清洗器。
1.2主要试药
槲皮素对照品(中国药品生物制品检定所,批号:100081-200406),白木香叶代泡茶(茂名市君元沉香种植发展有限公司提供,批号2012090220120904,甲醇及乙醇均为色谱纯,水为重蒸水。
2 方法与结果
2.1 理化鉴别
2.1.1 乙醇提取液的制备
称取代泡茶粗粉10 g,加入100 mL 95%乙醇,加热回流1 h,过滤,加水稀释至含醇70%的醇液,转入分液漏斗,加入等量石油醚萃取,除去叶绿素后,得乙醇提取液。
2.1.2 滤纸层析预试法
白木香叶乙醇提取液展开剂:95%乙醇显色剂,10%磷钼酸乙醇液。
混合指示剂:5 mL 0.1%甲基红乙醇溶液、15 mL 0.1%甲基橙水溶液、20 mL 0.1%石蕊水溶液,混合均匀;氨气;0.5%醋酸镁甲醇液。
点样量:0.1 mL。
显色方法:取直径12 cm的普通圆型滤纸一张,将滤纸折划分为4份,滤纸中心打一小孔,备插入滤纸芯之用,用毛细管将样品乙醇提取液点在距纸中心约l cm处,点样后,将一小条滤纸芯插入滤纸的中心小孔,移至盛有展开剂的直径为14 cm的培养皿中,进行层析。待溶剂的前沿达到滤纸近边缘后,取出滤纸,待溶剂挥发后,将滤纸剪为4份,分别喷以不同显色剂。从滤纸上出现的颜色斑点,初步确定样品的成分。
结果如下:盐酸-镁粉反应,红色;碱性酒石酸试验,棕红色沉淀;a-萘酚试验,界面出现紫红色环;茚三酮反应,深紫色。
2.2 薄层色谱法(TLC)
取本品粉末4 g,加水30 mL乙醇回流l h,趁热过滤,滤液浓缩至干,残渣加甲醇10 mL使溶解,作为供试品溶液。另取白木香叶代泡茶对照品,白木香叶子粉末4 g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述溶液各4 μL分别点于同一聚酰胺薄层板上,以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲酸(5∶5∶0.5)为展开剂,饱和30 min展开,取出,晾干。置紫外灯光(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
2.3 高效液相色谱法(HPLC)测定白木香叶代泡茶中的总黄酮含量
2.3.1 样
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