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苛养菌及人畜共患病原菌 检卫学院 李超 第十九章 小细菌 P295 内容：嗜血杆菌属、鲍特菌属 大纲要求：掌握嗜血杆菌属、鲍特菌属的生物学特性及鉴定 （布鲁菌属、巴斯德菌属、弗朗西斯菌属归于人兽共患病原菌） 第一节 嗜血杆菌属(Haemophilus) 嗜血杆菌属为一群无动力、无芽胞、菌体呈球杆状的革兰阴性小杆菌，生长营养需求高，培养时需人工加入新鲜血液(X因子和V因子)才能生长，故称嗜血杆菌。 对人类有致病意义的种有:流感嗜血杆菌(H.influenzae)、副流感嗜血杆菌(H.parainfluenzae)、杜克雷嗜血杆菌(H.ducreyi)、嗜沫嗜血杆菌(H.aphrophilus) 一、生物学性状 形态与染色：菌体短小、两端钝圆、革兰阴性小杆菌。从病灶中新分离的菌株多呈球杆状或双球状，有时可 培养特性: 需氧或兼性厌氧，初次分离需5～10%CO2才能生长良好，营养要求苛刻，在加入新鲜血液（含X因子和V因子）的巧克力培养基上经24h培养，见灰白色、圆形、光滑、半透明、直径 0.5 ～ 1mm小菌落。 部分毒性菌株(b型Hi) 可见粘液型菌落。 X因子V因子 X因子是对热稳定的物质，存在于血红蛋白中的一种血红蛋白衍生物，是一种含铁的卟啉。它是细菌合成过氧化物酶、过氧化氢酶、细胞色素氧化酶的辅基，这些酶类提供细菌氧化还原时进行电子传递。 V因子是对热不稳定的维生素B类物质，存在于血液和某些植物组织中。它是一种脱氢酶的辅酶，在细菌的呼吸中起递氢作用。 可以根据细菌对XV因子需要的不同进行嗜血杆菌属细菌的鉴定(见P295表19-1) 培养特性: 卫星现象：金黄色葡萄球菌和流感嗜血杆菌共同培养，由于金黄色葡萄球菌能合成较多的V因子，可以促进流感嗜血杆菌的生长，故在平板上可见金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落大，而相对较远处的流感嗜血杆菌菌落较小，此现象称为“卫星现象” 卫星现象 生化反应 对流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌的鉴别常使用吲哚、脲酶、鸟氨酸脱羧酶等试验进行(见P296表19-2)，由于嗜血杆菌属细菌生化反应的不稳定性，现多采用半自动化鉴定。 生化反应 二、临床意义 流感嗜血杆菌：以b型有荚膜株致病为主，以儿童为主，成人较少。在引起肺炎的革兰阴性菌中本菌占第3位，仅次于铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌。 副流感嗜血杆菌：在某些地区致病情况与流感相似，甚至超过前者。 嗜沫、副嗜沫、溶血嗜血杆菌：上呼吸道常居菌，条件致病。 杜克雷嗜血杆菌：软性下疳的病原菌。 三、微生物学检查 (一)标本采集 根据病变部位采集不同标本。肺部感染患者应尽量减少上呼吸道分泌物的污染。 (二)检验程序:见P297流程图 三、微生物学检查 (三)检验方法 1、直接镜检:多用于脑脊液和脓液标本的检验，对呼吸道标本一般不采用直接镜检方法，总体意义不大。 2、分离培养：气体环境、培养基、XV因子需要、抑菌物质(每毫升巧克力琼脂内加万古霉素50ug，杆菌肽300ug，氯林可霉素1ug)、卫星现象 检验方法 X因子V因子需要试验 四、预防措施 对Hib感染最有效的预防措施是肌肉注射Hib偶联菌苗。芬兰赫尔辛基于70年代后期在0～4岁儿童中Hib脑膜炎的发病率为43/10万。注射上述菌苗后到1991年发病率降为0。 Hib的PRP可与4种蛋白载体（变异性白喉杆菌蛋白－Oligosaccharide –CRM197 protein, HbOC、白喉杆菌类毒素－Diphtheria toxoids, D、脑膜炎双球菌外膜蛋白复合物－Outer membrane protein compound, OMPC和破伤风杆菌类毒素－Tetanus toxoid，T）偶联，分别构成4种类型的偶联菌苗：PRP-HbOC、PRP-D、PRP-OMPC和PRP-T。目前至少有25个国家将Hib偶联菌苗列入儿童的免疫计划。 Hib偶联菌苗价格较昂贵，限制了它在发展国家内应用，因此有人报道了一种经济的接种方案，即是给婴儿接种1/2或1/3 三针全剂量的Hib偶联菌苗，借此替代常规3针全剂量免疫的接种方案。以替代方案接种后91％～100％的婴儿仍可达到保护性抗体的浓度30.15mg/ml），与3针全剂量的接种方案所产生的结果相似。若采用替代的接种方案可减少菌苗接种的费用，以利于在发展国家中推广应用Hib偶联菌苗。 补充资料 软下疳1:该图为典型的链状排列的杜克雷嗜血杆菌，用人血液培养后取材涂片，革兰氏染色阴性，链状排列。 补充资料 软下疳3:左侧腹股沟部有一个潜行性较深溃疡，边缘不整齐，略呈蛇形，溃疡基底有脓性渗出物，溃疡周围皮肤呈现紫红色晕。另有三个豆大、一个指头大卫星状溃疡性病损。病损触之疼痛。 第三节