药分试验二—药物的特殊杂质检查.ppt

实验二药物的特殊杂质检查 知识目标 掌握紫外分光光度法等用于特殊杂质检查的一般操作 熟悉本实验药物中的特殊杂质的来源途径和检查原理 掌握一般杂质检查的原理、操作方法及注意事项 能力目标 能按照质量标准完成药品的杂质检查工作，并能合理 　地解释检测中的现象及异常情况。 学习目标 概述 药物的特殊杂质是指在该药物生产和储藏过程中,根据其生产方法、工艺条件及药物本身结构性质可能引入的特有杂质。 检查方法 维生素E中游离生育酚的检查 物理性质的差异 化学性质的差异 光学性质的差异 色谱性质的差异 腺苷钴胺中羟钴胺素的检查 《药品检验操作标准》规定 遵循平行操作原则 （1）仪器的配对性 如比色皿应配对 （2）空白与供试品的同步操作 正确的取样及供试品的称量范围 ≤1g不超过±2%， ＞1g不超过±1% 正确的比色、比浊方法 检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试品和空白各复查二份 一、原理 腺苷钴胺中羟钴胺素的检查 本法利用药物与杂质紫外特征吸收的差异进行检查。如果药物在杂质的某一吸收波长处没有吸收，则可在此波长处测定药品溶液的吸收度，通过控制样品溶液的吸收度来控制杂质限量。羟钴胺素是腺苷钴胺生产和贮藏中引入的杂质，可通过比较不同最大吸收波长处的吸收度比值，来控制羟钴胺素的限量。 避光操作。取本品用氯化钾溶液（取0.2mol/L氯化钾溶液250ml与0.2mol/L盐酸溶液53ml，用水稀释至1000ml）溶解并稀释制成50μg/ml的溶液，照紫外-可见分光光度法（《中国药典》2010版二部附录Ⅳ A）测定，在460nm与352nm波长处的吸收度比值应不低于0.90。 校准仪器——准备样品——选择测定波长——进行空白试验——测定样品 （空白、供试品） 注意事项 本实验必须避光操作，因为腺苷钴胺见光极易分解成羟钴胺素，会严重影响测定结果的准确性。 腺苷钴胺标示量为0.25mg，故取10片腺苷钴胺片置50ml量瓶中溶解并稀释至50ml，即得到实验所需的50μg/ml溶液。 腺苷钴胺片溶解时，由于其含有其他辅料影响实验效果，必要时进行离心操作，取澄清液进行实验。 紫外-可见光谱区域 紫外-可见光区一般用波长（nm）表示。其研究对象大多在200-380nm的近紫外光区和/或380-780nm的可见光区有吸收。 药典关于吸光度的测定要求 1.溶剂 ◆能充分溶解样品 ◆与样品无相互作用 ◆挥发性小 ◆在测定波长下吸光度符合要求 检查方法：以空气为空白，在特定的波长下，溶剂在1cm 石英吸收池吸光度应符合要求。 2.空白试验 目的：消除溶剂和吸收池对测定结果的影响 方法：用参比溶液调吸光度为0，再测定样品吸光度。 参比溶液：不含要测定样品的溶液。 维生素E中游离酚的检查 原理： 维生素E中未酯化的游离生育酚是一种特殊杂质，其检查原理是利用游离生育酚的还原性，在一定条件下可以被硫酸铈定量氧化。根据消耗硫酸铈滴定液（0.01mol/L）的体积来控制游离生育酚的限量。 生育酚 + 2Ce4+ 2Ce3+ + 对-生育醌 试剂：硫酸铈滴定液（0.01mol/L） 二苯胺（指示剂：亮黄→灰紫） 检查方法： 二苯胺试液 1滴 供试品0.10g 无水乙醇 5ml 溶解 硫酸铈滴定液 0.01mol/L 滴定 药典规定 消耗硫酸铈滴定液（0.01mol/L）≤1.0ml 生育酚 ：Ce4+ = 1 : 2 生育酚的摩尔质量 M = 430.8 消耗硫酸铈液（0.01mol/L）≤1.0ml 每1ml硫酸铈滴定液（0.01mol/L）相当于0.002154g的 游离生育酚 游离生育酚限量为2.15% 注意事项 滴定终点至溶液由亮黄色转变为灰紫色，持续10秒钟 反应速度： 分子量较大，反应慢 易被O2氧化 溶剂： 维生素E易溶于有机溶剂，不溶于水 进行空白实验，消除试剂影响 乙醇 葡萄糖有一个醛基，易被氧化成葡萄糖酸。所以如果未被氧化，在极少量氢氧化钠作用下酚酞应显粉红色。如果2.0g中存在一定含量的葡萄糖酸，那么足以中和掉这极少量的氢氧化钠，甚至让溶液呈酸性了，所以酚酞为无色。 另外，使用新沸腾过的冷水的目的是出去水中溶解的氧。 葡萄糖有一个醛基，易被氧化成葡萄糖酸。所以如果未被氧化，在极少量氢氧化钠作用下酚酞应显粉红色。如果2.0g中存在一定含量的葡萄糖酸，那么足以中和掉这极少量的氢氧化钠，甚至让溶液呈酸性了，所以酚酞为无色。 另外，使用新沸腾过的冷水的目的是出去水中溶解的氧。