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药品质量检测技术 第六章 仪器分析 教学目标 1.掌握紫外分光光度法及可见分光光度法的 基本原理 2.掌握色谱法基本理论 3.了解分光光度法和色谱法在工业生产和科学研究 中的应用 知识要点 1.吸收光谱与物质结构的关系和光吸收基本定律 2.色谱法基本理论 技能要点 1.紫外-可见分光光度计的应用 2.GC、HPLC、TLC的基本应用 第一节 分光光度法 一、概述 二、紫外-可见分光光度法 三、红外分光光度法 一、概述 分光光度法: 测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内对光的吸收度,对物质进行定性、定量分析的方法称为分光光度法。 主要包括: 紫外分光光度(电子光谱)法:吸收光波长范围200~400nm,可用于物质的定性和定量分析。 可见分光光度(电子光谱)法:吸收光波长范围400~760nm,主要用于有色物质的定性和定量分析。 二者合称为紫外-可见分光光度法即UV-ViS 二、紫外-可见分光光度法 光的基本特性 物质对光的选择性吸收 吸收定律 紫外吸收光谱的应用 紫外-可见分光光度计 光的基本特性 光是一种电磁波,具有波粒二象性。光的波动性可用波长?、频率?、光速c、波数(cm-1)等参数来描述: ? ? = c ; 波数 = 1/ ? = ?/c 光是由光子流组成,光子的能量: E = h ? = h c / ? (Planck常数:h=6.626 × 10 -34 J × S ) 单色光:单波长的光(由具有相同能量的光子组成) 白光(太阳光):由各种单色光组成的复合光 物质对光的选择性吸收 物质的吸收光谱曲线: 吸收定律 吸收系数 A=Kbc中比例常数K称为吸收系数; 物理意义:单位浓度的溶液液层厚度为1 cm 时,在一定波长下测得的吸光度。 在药品检验的实际工作中,通常有两种表示方法: 质量吸收系数a 当c的单位为g/L,b的单位为cm时,K用a表 示,称为质量吸收系数这时朗伯-比耳定律为: A=abc。 摩尔吸收系数ε 当式中浓度c的单位为mol/L,液层厚度的单位为cm时,则用另一符号ε表示,称为摩尔吸收系数,它表示物质的浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时,溶液的吸光度。其单位为L/mol·cm。这时朗伯-比耳定律就变为: A=εbc 紫外吸收光谱的应用 鉴别:同一物质在相同条件下,测得的紫外-可见吸收光谱应具有完全相同的特征。 对比吸收光谱特征参数 比较吸收度比值的一致性 对比吸收光谱的一致性 杂质检查:药物与杂质的吸收光谱有明显差别 含量测定:朗伯-比耳定律 对照品比较法 吸收系数法 计算分光光度法 紫外-可见分光光度计 仪器的基本组成部件 信号显示器 早期使用的是检流计、微安表、电位计、数字电压表、自动记录仪等。 现代的分光光度计广泛采用数字电压表、函数记录仪、示波器及自动记录型装置和数据处理台(称为工作站)。 紫外-可见分光光度计的类型 单光束分光光度计: 常用的有751G型、752型、721型、722型。 双光束分光光度计 : 常用的有710型、730型、UV-210型等。 双波长分光光度计 : 与单波长分光光度计的主要区别在于采用双单色器。 三、红外分光光度法 红外吸收产生的原理与条件 红外光谱法的应用 红外光谱仪 红外吸收产生的原理与条件 原理:当分子中某个基团的振动频率和红外光的频率一致时,分子就吸收红外光的能量,从原来的基态振动能级跃迁到能量较高的振动能级。物质对红外光的吸收曲线称为红外吸收光谱。 根据试样的红外吸收光谱进行定性、定量分析和确定分子结构等分析的方法,称为红外分光光度法。 红外光谱产生的条件 红外光的能量应恰好能满足振动能级跃迁所需要的能量,当红外光的频率与分子中某基团的振动频率相同时,红外光的能量才能被吸收。 红外光与物质之间有耦合作用。分子必须有偶极矩的变化。 红外光谱法的应用 定性分析 研究分子结构:如确定分子的空间构型,求化学键 的力常数、键长和键角及未知化合物的结构鉴定等。 定量分析 红外光谱定量分

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