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药理学实验详悉
一、动物实验
动物实验是根据研究目的,恰当地选用标准的符合实验要求的实验动物,在设计的条件下,进行各种科学实验、观察、记录动物的反应过程或反应结果,以探讨或检验生命科学中未知因素的专门活动。动物实验是人类生存和发展的必要手段。
动物实验方法是进行动物实验时的各种实验手段、技术、方法和标准化操作程序。也探讨实验动物科学中的减少、替代、优化问题。
实验动物的选择:首先应从生物医学研究的目的和实验要求来选择实验动物,进而考虑实验动物是否容易获得、是否经济、是否容易饲养。一切实验动物应具有个体间的均一性,遗传的稳定性和容易获得三个基本要求。
标准化原则:根据对实验质量的要求选择标准化的实验动物 。动物实验中选择和使用与研究内容相匹配的标准化的实验动物标准化动物:是指遗传背景明确或来源清楚的,对其携带的微生物和寄生虫实行控制,模型性状显著且稳定的动物。在精确试验中,鉴于动物体内外的微生物和寄生虫会干扰试验的结果,最好选择无菌动物或悉生动物,至少也应SPF级动物。
规格化原则:选择与实验要求一致的动物规格。
实验动物年龄与体重一般呈正相关性,可按体重推算年龄。一般来说,实验动物年龄、体重应尽可能一致,相差不得超过10%。
不同性别的动物对同一药物的敏感程度是有差异的,如实验无特殊要求应选择雌雄各半做实验,以避免因性别差异所造成的结果误差。 特殊的生理状态下,如发情、妊娠及哺乳期,机体对实验的反应性发生改变。
★实验动物的选择应用应注意有关国际规范:GLP、SOP、“3R”(Replacement替代 Reduction减少 Refinement优化)
(一)实验动物:系指遗传背景明确、来源清楚、对其携带的微生物、寄生虫实行控制,经科学方法人工培育用于科学实验的动物。
(二)实验动物的分类方法
1、按遗传学控制分类
*近交系:杂种动物经过相当于20代全同胞兄弟单纯连续繁殖,各条染色体上的基因趋于纯合,品系内个体差异趋于零。
近交动物的特征:
a、纯合性和一致性——纯合性指的所有动物的基因位点都应是纯合的。一致性指的是任何可遗传的体征都完全一致。例如:血型和组织型,体重、毛色。
b、遗传稳定性
c、特异性——就整个近交系小鼠而言,每个近交系在遗传上都是独特的,几乎每个近交系都建立了各自的遗传概况。
d、分布于各地,引一对即可繁殖。
e、背景资料和数据较完整。
*封闭群:以非近亲配种方式进行繁殖生产的一个种群,在不从外部引入新血缘条件下,至少连续繁殖四代以上。
封闭群的特点:
a、由于非近交,具有杂合性,从而避免近交衰退的出现。
b、由于没有引进新的血缘,种群间遗传特性能保持相对稳定。
c、群内个体间,因其具有杂合性,所以个体间的反应性具有差异,重复性和一致性不如近交系。
2、按微生物学分类
*普通级动物 Conventional(CV)Animal:不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。
*清洁动物 Clean(CL)Animal:除普通级动物应排除的病原体外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体。饲养在屏障系统中。空气要经过滤净化,饲养室要保持正压,进入室内的—切物品要经过消毒灭菌,工作人员进入要洗澡和穿灭菌工作服,动物饮水要经灭菌。
*无特定病原体动物 SpecificPathogenfree(SPF)Animal:除清洁动物应排除的病原外,不携带主要潜在感染或条件致病菌和对科研干扰大的病原。饲育在屏障系统中,是通过无菌动物、悉生动物、SPF 动物而获得的。笼具、饲料饮水都要经过特殊处理,并有严格的检疫、消毒、隔离制度。国外所作的科研实验主要使用 SPF 动物。
*无菌动物 Germfree(GF)Animal:无可检出的一切生命体。此种动物自然界中并不存在,它是经人工剖腹产净化培育出来的。在隔离器中剖腹产取出其仔体,用无菌母鼠代乳或人工哺乳。
悉生动物(GnorobioticAnimal):动物体内所携带生命体(病毒、细菌、真菌、原虫和寄生虫)是已知的,也叫已知菌动物。
(三)动物实验设施的分类:
l、开放环境(Open environment):饲育环境与外界相同,有强力通风设施,饲料、饮水和垫料要求不被污染,应有防鼠,防昆虫措施。
2、屏障环境 (Barrier environment)洁净度万级:饲育环境是密闭的。送入的空气需经过滤,洁净度达到万级,饲料、饮水、垫料需灭菌后方可使用,饲养人员进入要经过淋浴,穿无菌工作服,戴口罩、手套。
3、隔离环境 (Isolation environment)洁净度百级:是一个隔离器(Isolator)为主体及其它附属装置组成的饲养系统,送入的全新风要经—百级以上洁净度过滤,一切物品都要经严格灭菌后经传递仓送入,饲养人员不得入内
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