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2011年乌鲁木齐市手足口病病原监测分析
【摘 要】目的:分析手足口病的流行情况并进行病原学监测,探讨手足口病的流行规律并了解乌鲁本齐市2011年手足口病病原特点,为今后防治工作提供科学依据。方法:对乌鲁木齐市2011年的490例手足口病患者标本采用实时荧光PCR法,其中咽拭样本284份、粪便样本204份、肛拭样本2份进行肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组(CA16)的检测。结果:实验室检测的490例样本中, EV71检出193例, CA16检出201例, 其他肠道病毒检出43例。病原监测发现2011年以EV71 和CA16病原流行为主。结论:实时荧光PCR方法用于手足口病EV71和CA16病原的检测,是一种快速、特异性强的检测方法。2011年乌鲁木齐市手足口病疫情自4月以来有明显增高趋势,9月份以后明显减少,同时六岁以下婴幼儿为主要发病人群。
【关键词】手足口病;实时荧光PCR;肠道病毒
【中图分类号】R181.81 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2013)05-0589-02
手足口病( hand food mouth disease,HFMD) 是由肠道病毒引起的一种儿童常见急性传染病[1],多种病毒都可以引发手足口病的流行。该病易感人群属学龄前儿童,以5岁以下婴幼儿为主,3 岁以下散居儿童发病率为最高[2]。该病传播速度快[3],控制难度大,疾病负担重[4]。在临床上,手足口病以发热和手、足、口腔等部位的疱疹、斑丘疹或皮疹为主要特征,重症病例可出现迟缓性麻痹、
脑炎、脑膜炎、脑脊髓炎、肺水肿、循环衰竭等[5]。多数患者症状轻微,一周内能够痊愈且预后良好。传染源系现症患者和隐性患者,主要通过人群消化道、呼吸道和分泌物密切接触等途径传播[5]。因此,越来越受到卫生工作者的重视[1]。本文应用实时荧光定量PCR检测了490份手足口病患儿粪便、咽拭子标本。分别测定肠道病毒(EV)通用型(以下简称EV)、柯萨奇病毒A组16(CA16)和EV71型核酸,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 对象
2011年乌鲁木齐市各区县疾控中心和监测哨点医院送病毒实验室的手足口病患者标本,年龄在4个月至42岁。采集咽拭样本284份、粪便样本204份、肛拭样本2份,共记490份。
1.2 诊断标准
手足口病的临床诊断病例、实验室确诊病例和重症病例的定义参照手足口病诊断标准参照卫生部颁布的《手足口病诊疗指南(2010年版)》。
1.3 试剂和仪器:
荧光PCR试剂购自北京金豪制药股份有限公司,引物包括肠道病毒通用型、CoxA16和EV71型。采用美国BIO RAD iQTM5多重实时荧光PCR仪进行检测。
1.4 方法
1.4.1 标本处理 肠道病毒RNA提取,《手足口病预防控制指南(2009版)》。
1.4.2 实时荧光PCR扩增,《手足口病预防控制指南(2009版)》。
1.4.3 结果判断
检测样本Ct值大于37为阳性;
无Ct值或Ct值为0报告该反应阴性;
37Ct值40为灰区。
复检结果Ct值小于40的样本为阳性,否则为阴性。
1.4.4 质量控制
每次试验应设置阳性对照和阴性对照,且应符合以下要求,否则试验结果不成立。
阴性对照无Ct值或Ct值为0。阳性对照Ct值小于30。
2 结 果
2.1 实时荧光PCR检测结果
实验室检测的490份样本中, 有439例检出肠道病毒, 检出率89.59%, 其中CA16检出201份,检出率为41.02% , EV71检出193份,检出率为39.39% 。其他肠道病毒检出43例,检出率为8.78%。CA16和EV71为2份,检出率为0.41%。
2.2 EV71 和CA16的感染情况的时间分布
全年4月份以前报告手足口病病例较少,4月份之后,检测样本增多,并且EV71和CA16病原同时存在。9月份之后,检测病例样本数急剧下降,仍然以EV71和CA16病原同时存在,不同月份检测结果见图1。
图1 EV71和CA16感染情况的时间分布
2.3 EV71和CA16感染情况的地区分布
乌鲁木齐全市7区1县均监测到CA16病原, EV71病原仅达坂城区未检出, 不同区县检测结果见表1。
2.4 不同样本EV71和CA16的检出情况
490份样本中,共采集咽拭子样本284份、粪便标本204份、肛拭子标本2份, 结果咽拭子样本EV71阳性93份(32.75% ) 、CA16阳性122份(42.96% ), 粪便样本EV71 阳性99份(48.53% ) 、CA16阳性79份(38.73
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