HER2在胃癌的表达和意义.docVIP

HER2在胃癌的表达和意义 　　【摘 要】目的：探索HER2表达与胃癌恶性度的相关性。方法：应用pathway array analysis 分析HER2在43例胃癌的表达情况。结果：43例样本中，13例呈HER2阳性表达，阳性表达率30.23%；在阳性表达病例中，高分化癌1例（占全部高分化癌的7.69%），中分化癌3例（占全部中分化癌的23.08%），低分化癌9例（占全部低分化癌的52.94%）。三组间比较χ2=7.603 ν=2 0.010〈p〈0.025。结论：HER2的阳性表达与胃癌肿瘤细胞分化程度有显著相关性。 　　【关键词】HER2；胃癌；恶性度；相关性 　　【中图分类号】R36 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）05-0028-02 　　胃癌在人类癌症病死率中居第二位[1]。HER2作为一种肿瘤相关抗原，已经被学术界认识，目前，其与胃癌的相关性的报道虽已不少，但尚缺乏明确而统一的结论， 探索HER2表达与胃癌恶性度的相关性，本文应用pathway array analysis方法进行研究。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 标本来源 收集我院近5年胃癌手术切除组织标本，按照肿瘤细胞分化程度分为3组：高分化癌13例、中分化癌13例、低分化癌17例。全部标本在取材后20min内先置于干冰上，再置入-70℃冰箱低温保存。 　　1.1.2 抗体 本研究共采用抗体106种，购自Cellsignal公司和Sigma公司。具体为：14-3-3β/cPKCαERK/EGFR，WeeI/Cdc25C， Hsp90/CHKI，MDM2/cdc2 p34，E2F-1/PCNA， Cdk6/cdc25B，cyclin E/cdk2， ETSl/HIF-1α， HIF-2α/TTF-1，c-myc/FGFR-3（B-9）Notch 1/β-catenin，Akt/Trap， IAP/Bcl-2，P-PKCα（Ser657）/p-EGFR（Tyr1068）， p27/BRCAl，Cdk4/Neu，p-cdc2（Tyrl5）/p-c-Jun （Ser73），p-Rb（Ser807/811）/p-SAPK/JNK（Thrl83/Tyrl85），p-FLT3（Tyr591）/p-p38（Thrl80/Tyrl82），Protein marker（Invitrogen）+IgG（25ng）cyclin Bl/ cyelin D1， p-IKB（Ser32）/p-IGF-1 R/Insulin R（Tyrll31/Tyr1146），VEGFR2/ p14，H-Ras-Bcl-6，K-Ras/α-tubulin，NFkBp65/Mfl-6，p-PKCα/βⅡ（Thr638/ 641）/p-p53（Ser392）. p-β-catenin（Ser33/37/Thr41）/p-Stat3（Ser727）/p- ERK/p-star5（Tyr694）， p-AKT（Ser473）/p-PTEN（Ser380）， p16/p27， P-HGF， p-RB（Ser7S0）/p-Survivin，Thr202/Tyr204）（P44/42）P-c-Kit（Tyr719）/p-EGFR（Tyr1148）， p-mTor（Ser2448）/p-PKCδ（Thr505），p-p70 S6 Kinase（Thr389）/ p-VEGFR Receptor 2（Tyr951）p-FGFR（Tyr653/654）/p-elF4B（Ser422）， cdc42/ Eif4b，R/c-MET（Y1003）/p-CREB（Serl33）， CREB/ATFl， p53/Notch4（L5c5）PTEN/ SRC-1，p300/ckit，Bax/N-cadherin，raf-1/PCNA，β-aetin/β-tubulin/GAPDH， TNF-α/Vimentin，OPN/Survivin， WT1/Mesothelin，Cleaved Caspase-3/CO×2， p2I/NFkB52， P-HGFR，c-MET（Y1234/Y1235）/p-Smad（Ser463/465）p-ERK5（Thr218/ Tyr220）/p-p90RSK（Ser380），NFkB50/Calretinin，E-cadherin/TGF-β。 　　1.2 方法 　　1.2.1 标本总蛋白提取和定量 ⑴取出准备好的标本，置于锡箔纸包被的干冰上，以防蛋白变性降解。⑵用取材管穿取大小为3mm*3mm*5mm的标本组织，加入1ml蛋白裂解液，用匀浆器研磨1min，裂解10min。⑶将制备好的组织匀浆转移至EP管。在超声水浴器中震荡3