咽拭子DNA检测在儿童肺炎支原体感染早期诊断价值的初探.docVIP

咽拭子DNA检测在儿童肺炎支原体感染早期诊断价值的初探 　　【摘 要】目的：探讨咽拭子DNA检测在儿童MP感染早期诊断价值。方法：对经临床和实验室诊断MP 感染的166例患儿同时进行MP-DNA、MP-IgM和MP 快速培养三种方法检测。结果 MP-DNA 检出率为95.78%（159/166）， MP-IgM 为69.88%（116/166），MP 快速培养为30.12%（50/166），三种方法的检出率差异有统计学意义（χ2 =160.2，P 0.01）。快速培养法检出率在3岁组明显高于≥3岁组，差异有统计学意义（χ2 =10.11，P0.01）；MP-IgM 检测法在病程≥7d组检出率高于7d组，差异有统计学意义（χ2 =7.96，P0.01）。结论 采用咽拭子DNA检测，是一种快捷、简便的方法，敏感性好，确诊率高，可作为早期诊断MP感染的手段，值得在临床上推广应用。 　　【关键词】儿童；肺炎支原体；DNA检测；咽拭子 　　【中图分类号】R72 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）05-0675-02 　　肺炎支原体（Mycoplasma Pneumoniae MP）是导致儿童急性呼吸道感染常见病原体之一，对儿童的健康造成很大的危害性，已越来越受到人们的关注[1]。为探讨咽拭子DNA检测在儿童MP感染早期诊断价值，本文通过对166例MP感染患儿进行MP-DNA、MP-IgM和MP 快速培养三种方法的检测，并对结果比较分析。 　　1对象与方法 　　1.1对象 选取2010年1月～2012年12月因MP感染入住儿科的166例患儿，其中临床和影像学诊断为支气管炎42例，肺炎122例；男149例，女117例；年龄6个月～14岁，平均（5.6±3.5）岁；根据患儿的年龄，分为0.05）。 　　1.2MP感染诊断标准[2]：①呼吸道症状和（或）体征；②X线胸片不同程度的肺部炎症表现；③MP-IgM阳性和（或）咽拭子MP-PCR检测阳性和（或）MP快速培养阳性；④用阿奇霉素或红霉素疗效满意。 　　1.3方法 　　1.3.1MP-DNA检测 清晨患儿未清理口腔，未进食饮水前（小婴儿停纳奶2 h以上），用无菌拭子采集患儿咽部分泌物送检，试剂盒采用迪安公司提供，操作过程严格按照试剂盒说明书进行。 　　1.3.2MP-IgM检测 取患儿静脉血2ml，分离血清，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法，严格按照试剂盒（深圳博卡生物有限公司）说明书进行操作及结果判定。 　　1.3.3 MP快速培养 清晨患儿未清理口腔，未进食饮水前（小婴儿停纳奶2 h以上），用无菌拭子采集患儿咽部分泌物，按MP快速鉴定培养液（陕西百盛园生物科技信息有限公司）说明书操作。培养24h后观察结果，若培养液颜色由原来的红色变为黄色则为阳性，而培养液颜色保持原来的红色不变则为阴性。 　　1.4统计学分析 率的比较采用χ2检验，P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　166例MP感染患儿MP-DNA、MP-IgM和MP快速培养三种方法检测阳性率分别为95.78%（159/166）、69.88%（116/166）、30.12%（50/166），差异有统计学意义（χ2 =160.2，P0.01）。快速培养法检测阳性率在3岁组明显高于≥3岁组（χ2 =10.11，P0.01），差异有统计学意义；MP-IgM 检测阳性率在病程≥7d组高于7d组，差异有统计学意义（χ2 =7.96，P0.01）。见表1。 　　3 讨论 　　MP是介于细菌与病毒之间，能独立生活的最小微生物，大小为200nm，是儿童及青少年呼吸道感染常见病原体之一，感染患儿临床表现很难与病毒性和细菌性呼吸道感染相鉴别，从而延误及时有效的治疗，并导致肺以外并发症的发生，因此快速准确地诊断在临床上显得尤为重要[3]。 　　本文结果显示，MP-DNA检测阳性率最高（95.78%），其次为MP-IgM检测阳性率（69.88%），快速培养法的阳性率最低（30.12%），与国内外报道一致[4-5]。MP-DNA检测是利用标记特异性荧光探针为特点的荧光定量PCR技术，减少扩增产物污染的机会，提高检测特异性，不管MP是否存活，只要有微量基因拷贝，就可以检测到，其不受患儿年龄、病程及用药情况等多方面因素的影响[6]。 　　对于婴幼儿来说，由于儿童免疫系统尚未发育完善，部分免疫功能低下，MP 感染时抗体产生不足，出现假阴性[7]；血清MP-IgM抗体多于MP感染后7天开始升高，并且该方法受年龄、时间、细胞功能及敏感性等因素的影响[8]，影响检出率；本文结果显示，MP-IgM 检测阳性率在病程≥7d组高于7d组，也说明了这一点，故在高度怀疑MP感染时，最好在病程1周后进