在结直肠癌循环肿瘤细胞中KRAS和PIK3CA的突变以及EGFR异质性的研究.ppt

Heterogeneity of Epidermal Growth Factor Receptor Statusand Mutations of KRAS / PIK3CA in Circulating TumorCells of Patients with Colorectal Cancer  Clinical Chemistry November 7， 2012 Study introduction 美国国家癌症综合治疗联盟（NCCN）《结直肠癌临床实践指南》(2011)明确指出： (1)所有转移性结直肠癌患者都应检测KRAS基因状态； (2)只有KRAS野生型患者才建议接受EGFR抑制剂（如爱必妥和帕尼单抗）治疗。NCCN《非小细胞肺癌临床实践指南》(2011)明确指出：当KRAS基因发生突变时，不建议使用EGFR-TKIs靶向治疗药物。 卫生部颁布的《结直肠癌诊疗规范（2010年版）》也明确指出：确定为复发或转移性结直肠癌时，检测肿瘤组织KRAS基因状态，以确定合适的治疗方案。 1.?Amado?R?G，?Wolf?M，?Peeters?M，Van?Cutsem?E?et?al.?Journal?of?Clinical?Oncology.?April?2008. 2.?Van?Cutsem?et?al.?ASCO?Annual?Meeting?2008:?abstract?2. 3.?Bokemeyer?et?al.?ASCO?Annual?Meeting?2008:?abstract?4000. 4.?Lièvre?et?al.?J?Clin?Oncol?2008; 26: 374-9. 5.?美国FDA相关网站：/AboutFDA/CentersOffices/CDER/ucm172905.htm EGFR 是一种跨膜酪氨酸激酶受体，与配体结合后可引起下游信号传导通路的活化， 如 ： KRAS BRAF(4%–12%) RAS-RAF-MEK-Erk/MAPK PIK3CA(14%–20%) P13K-AKT-PKC-IKK 在许多实体瘤中 EGFR 均有不同程度的表达，表达率最高为头颈部肿瘤 ， 达 95% — 100% 。 CRC 次之 ， 为 72% — 89% ， 胃 癌表达率为 41% — 64% ，并且 EGFR 表达率高的肿瘤恶性度高 ，侵袭力强 ， 预后差 。而且在同一患者中不同的CTCs中，EGFR的表达也存在着异质性。 [1]Goldstein N S, Armin M.Epidermalgrowthfactorreceptorimmunohisto chemicalreactivityin patients with AmericanJointCommitteeon Cancer StageIV colon adenocarcinoma:Implicationsfora standardized scoringsystem[J]. Cancer ,2001,92(5):1331-1346. [2]Bergstrom J D, Westermark B, Heldin N E.Epidermalgrowth factorre - ceptor signaling activates metin human anaplastic thyroid carcinomacells[J]. ExperimentalCellResearch ,2000,259(1):292-299.[3] Denning M F, Dlugosz A A, Cheng C, et al. Cross-talk betweenepidermalgrowth factorreceptorand protein kinase C during calciumnduced differentiation of keratinoytes [J]. Experimental Dermatology ,2000,9(3):192-199. Patients 4 Cell lines , culture conditions , and fluorescence in Situ hybridization analysis (MCF,MDA-MB-468,BT-20,MDA-MB-468A) Enumeration of CTCs by CS(FITC- the fourth channel of the CS) Sample preparation for molecular analysis after Cell Sear