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动物细胞工程复习 复习动物细胞工程快速复习题 * 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 核移植 动物细胞工程技术 1.动物细胞工程的基础是什么？ 2.动物细胞培养的基本原理是什么？ 3.动物细胞培养液的主要成分是什么？ 4.进行动物细胞培养的材料一般有何特点？ 动物细胞培养技术 细胞增殖 通常含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。 胚胎组织或幼龄动物的组织的细胞生命力旺盛，分裂能力强。 5.原代培养与传代培养有何区别 ? 6.动物体细胞培养技术能将一个分化的体细胞培养成为一个动物体吗？为什么？ 7.为什么要将组织分散成了单个细胞再进行培养？ 不能 8.怎样将动物组织分散成单个的细胞？ 9.为何要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来？ 10.细胞贴壁生长对培养容器有何要求？ 用剪刀剪碎组织，再用胰蛋白酶处理。 当贴壁细胞生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖—细胞出现接触抑制。 培养瓶的内表面要光滑、无毒、易于贴附。 11.哪些细胞会失去接触抑制？ 12.在体外培养动物细胞需要什么物质和环境条件？ 肿瘤细胞 无菌无毒环境、充足营养（血清或血浆）、适宜温度、PH、气体环境 （O2和CO2，C02的主要作用是维持培养液的PH）。 13.为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 14.多莉羊的诞生在生物学发展史上有何意义？ 15.为什么用于核移植的供体细胞一般都选用传代 10代以内的细胞？ 说明已经分化的动物体细胞核，仍然具有全能性，在合适的条件下，仍然可以发育成新的个体。 10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。 16.体细胞核移植获得高产奶牛过程中，利用了哪些现代生物技术手段？ 17.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？ 动物细胞培养技术、亚显微操作技术、核移植技术、胚胎移植技术、细胞融合技术 否。绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。 18.体细胞核移植技术还存在什么问题？ 成功率非常低； 绝大多数克隆动物还存在健康问题 19.什么是克隆？ 从一个共同的祖先通过无性繁殖的方法繁殖出来的一群遗传特征相同的DNA分子、细胞或个体的过程。 20.无性繁殖和有性繁殖的主要区别是什么？ 21.动物细胞融合的基本原理是什么？ 22.什么是病毒的灭活？ 有性繁殖是通过产生有性生殖细胞——配子（包括精细胞、卵细胞），配子结合后生长成新的个体。 无性繁殖是不涉及生殖细胞，由母体的一部分直接产生子代的繁殖方法。 细胞膜的流动性 灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。 单克隆抗体 筛选 杂交细胞 杂交瘤细胞 体外或体内 细胞培养 筛选 骨髓瘤 细胞 诱导细胞融合 特异性杂交瘤细胞 杂交瘤细胞系 提取 经过免疫的 B淋巴细胞 动物细胞融合技术 动物细胞培养技术 单克隆抗体的制备过程： 特点：既能产生专一抗体又能大量繁殖 特点：特异性强灵敏度高可大量制备 注射抗原 免疫 23.从何处取得经过免疫的B淋巴细胞？ 24.把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起融合时， 有几种融合方式？ 离心、振动、电激；聚乙二醇；灭活的病毒 从免疫动物的脾脏获取。 B-B融合细胞 杂交瘤细胞 瘤-瘤融合细胞 资料： 细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。淋巴细胞有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。骨髓瘤细胞中只有D途径而没有S途径，但能不断分裂增殖。 在培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞，就是杂交瘤细胞。这种培养基被称为“HAT”选择培养基。 25.如何筛选杂交瘤细胞？ 26.筛选出的杂交瘤细胞产生的是同一种抗体吗？ 否，由于与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞有许多种，因此从这些种杂交瘤细胞中提取抗体的仍然是多种抗体的混合物。 27.怎样从众多杂交瘤细胞中筛选到能产生我们需要的产生特异性抗体的杂交瘤细胞？ 通常采用克隆细胞的方法获得单细胞克隆，再利用抗原抗体杂交法检测，筛选出分泌产生所需特异抗体的杂交细胞株，然后进行扩大培养。 * * *