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by Janice Kal Van Tam, Koichiro Uto, Mitsuhiro Ebara, Stefania Pagliari,Giancarlo Forte and Takao Aoyagi SCIENCE AND TECHNOLOGY OF ADVANCED MATERIALS Volume 13 (6) nov 23，2012 IF=3.752 汇报人：田洁 2013年10月29日 目录 黏着斑（focal adhesion）的结构和功能 Schematic of cell adhesion(FA桥连ECM和肌动蛋白细胞骨架) Structure of mature focal adhesions Cell adhesion rates of (a) hMSCs and (b) NHDFs assessed by AlamarBlue? assay Human mesenchymal stem cells do not express vinculin protein when grown on a very compliant substrate Human mesenchymal stem cell multipotency on PCL films with different stiffnesses Thank You! 欢迎各位老师、同学批评和指正！ * * * Cell adhesion is a complex process that can be divided into different phases. A floating cell (1) canphysically contact with the substrate. In the first phase of cell–matrix interaction (2) the cell adheres passively and starts sensing thesubstrate. This phase is guided by gravity and followed by cell reshaping and the concomitant adhesion processes (3), resulting in animmature form of the focal adhesions (4). These structures are macromolecular complexes connecting the extracellular matrix to thecytoskeleton, the scaffold of the cell. A number of docking and shuttling proteins are involved in such a process.细胞通过ECM感受基底弹性和奈米图案成形，之后由外而内 的力传导，使细胞产生牵张力，重塑细胞形态和基因表达。 BD Matrigel基底膜基质在室温条件下，聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，以及对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达的研究。 BD Matrigel 基底膜基质形成的三维培养基质，可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时，Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达，支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。高浓度的Matrigel适用于研究体内血管生成和肿瘤细胞迁移及肿瘤模型的建立等。 在PCL和TCPs上生长 hMSCs和NHDFs，在3和8h时 用AlamarBlue?检测粘附的细胞。alamarBlue?是一种氧化还原(REDOX)指示剂，根据细胞增长引起培养基内部的化学还原反应，发生相应的荧光和颜色变化。 hMSCs在非常顺应的基底上 不表达黏着斑蛋白（vinculin） 细胞生长在MATRIGEL上8h（上线）和24h （中线），肌动蛋白和黏着斑蛋白分别被染成 红色和绿色。细胞核用DAPI对比染色。 在3D微环境中小管的形成伴随着明显的 细胞骨架的重新排列和形态改变，然而 vinculin的表达没有检测到，下线表示 的高分辨率的图像。 （a）结果分析：由于vinculin聚集物的面积与静止的细胞中FA中产生的力的量有关。细胞在较硬的基质上将感受ECM产生的更大的力，所以与在软基质上相比，在细胞的周围聚集更多的vinculin。然而，经过24h培养后，在软的PCL上延迟的vinculin的聚集和成熟逐渐出现，在黏着复合物上加强了