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各种标本的留取方法 标本类型 血液 尿液 粪便 痰及上呼吸道标本 脑脊液 浆膜腔积液 胆汁 脓性分泌物 采血指征 患者出现一下体征时可作为采血的重要指征: 发热(≧ 38 ℃ )或低温(≦ 36 ℃ ),寒战 白细胞增多(计数大于10,000×109/L,特别有“核左移”未成熟的或杆状的白细胞),粒细胞减少(成熟的多核白细胞小于1000 ×109/L ),血小板减少, 皮肤粘膜出血,昏迷,多器官衰竭,血压降低,CRP升高及呼吸加快 或同时具备上述几种体征应采血培养 对入院危重患者未进行系统性抗生素治疗之前,应及时采集血培养 皮肤消毒程序 70%酒精檫拭静脉穿刺部位待30秒以上 1%-2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒,从穿刺向外以1.5cm-2cm直径画圈进行消毒 70%酒精脱碘 (对碘过敏的患者,用70%酒精消毒60秒,带酒精挥发干燥后采血) 培养瓶消毒程序 用70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞,作用60秒 用无菌纱布或棉签清除橡皮塞表面酒精,然后把血液注入培养瓶。 静脉穿刺和培养瓶接种程序 在穿刺前或穿刺期间,防止静脉滑动,带无菌乳胶手套固定静脉,如行第二次穿刺,应换针头。 用注射器对成人不同部位穿刺取血,勿换针头直接注入血培养瓶,或严格按厂商推荐方法采血。 血样接种到培养瓶后,轻轻颠倒混匀防止血液凝固。 用70%酒精清洁皮肤穿刺部位去除残留碘。在皮肤上避免使用胶粘剂或不透气的敷料。 立即送检,勿冷藏。 采血量 成人:8-10ml 儿童:1-5ml 一般血液标本与培养基比例为1:10为宜 血培养份数和采血时间 采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行,在24h内采集2-3份血培养。 对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.5-1h采集,或在寒战或发热后1h进行。 对特殊的全身性和局部感染患者采集血培养的建议 怀疑急性原发性菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎及肺炎的患者,应立即采集2或3份进行血培养。 不明病原的发热,如隐形脓肿、伤寒热和波浪热,先采集2或3份以上。 怀疑菌血症或真菌菌血症,但血培养持续阴性,应改变血培养方法,以获得罕见的(或苛氧的)微生物。 对急性心内膜炎患者,在1-2h内采集3份血培养,如果24h后阴性,在采集3份以上的血培养。入院前两周内接受抗生素治疗的患者,连续三天,每天采集2份。 标本运送 采血后应立即送检,如不能立即送检,需室温保存或置35—37孵箱中,切勿冷藏。 自动连续监测系统虽有允许延迟上机监测微生物生长的原理,还是应该尽量减少延迟上机时间。 尿液标本 采集时间及送检 通常应采集晨起第一次尿液送检,原则上应选择在抗菌药物应用之前采集。 尽量采集晨尿,因为经过膀胱的夜间孵育,细菌量会增加。对于无症状的病人应连续三天晨尿送检。 不要因想得到病人的自排尿而强迫他们摄入过多的水分,额外的摄入会稀释尿液并有可能使细菌计数降至105CFU/ml以下 尿液标本采集后应在2h内进行培养,否则应置4-8 ℃ 冰箱冷藏保存,经冷藏的标本尽量在8h内进行接种。 标本采集 Midstream voided urine (中段尿) 肾盂尿采集法 膀胱穿刺术 中段尿 临床上最多采用的方法 简单易行,无感染的危险 这种方法不适合厌氧培养,因在尿道及周围有许多厌氧菌存在,有污染可能 女性患者 先以肥皂水或以1:1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口 再用灭菌水清洗 最后用灭菌纱布擦拭 排尿弃去前段尿,留取中段尿10ml左右于无菌容器内加盖送验 采集中段尿最好由专门护士采集,以减少污染。 男性患者 先用肥皂水清洗尿道口 再用清水冲洗后留取中段尿 包皮过长者为防止包皮内细菌的污染,将包皮翻开冲洗后再留取中段尿。 儿童患者 采集中段尿较困难 如尿中细菌明显增多,可高度怀疑urinary tract infection(尿路感染), 无细菌则可否定 细菌数居中时,有必要用导尿或膀胱穿刺术采集尿液。 肾盂尿采集法 确定bacteriuria(菌尿)是否来自肾脏,可通过膀胱镜,输尿管插管采集左、右肾盂尿。 膀胱穿刺术 采用耻骨上膀胱穿刺术取尿 一般用于anaerobe培养,故在取得尿液后,针头插于无菌橡皮塞上立即送检 一般应用于新生儿、幼儿以及中段尿培养阴性又怀疑泌尿系感染的患者。 便标本 临床问题 人体肠道中的细菌种类和数量繁多,健康人肠道内常见细菌有无芽孢厌氧杆菌(如拟杆菌等)、大肠埃希菌、产气肠杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、粪产碱杆菌、枯草杆菌、棒状杆菌、葡萄球菌、肠球菌及酵母菌、念珠菌属等,这些细菌在肠腔内通常是不致病的。引起腹泻的病原菌有致病性大肠埃希菌、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属、爱德华菌属、弧菌属、弯曲菌属、厌氧芽孢杆菌属等。 临床问题 腹
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