2.1修复机制.ppt

2.1修复机制 1.光复活 3.重组修复 复制同时的修复 4.SOS修复 SOS—求救信号 DNA损伤严重，复制受到抑制，前几种方法难以奏效时： 第三节 细菌的限制性核酸内切酶和基因重组 3.1 细菌的限制性核酸内切酶 应用——生化工具 DNA切割→测序 PCR—聚合链式反应 用色谱技术分纯 PCR—聚合链式反应 聚合链式反应（polymerase chain reaction，PCR）是一种体外模拟自然DNA 复制过程的核酸扩增技术，即无细胞分子克隆技术。 PCR 技术简介： PCR 技术由Mullis于1985年发明。它以待扩增的两条DNA链为模板，由一对人工合成的寡聚核苷酸引物介导，通过DNA聚合酶酶促反应，快速体外扩增特异的DNA序列。 PCR技术中每轮循环包括变性、复性和延伸3个阶段，约经过30轮循环就可迅速将待扩增的DNA扩增数百万倍。 PCR 技术简介： 由于PCR 技术具有操作简单、快速、特异和灵敏的特点，被认为是本世纪核酸分子生物学研究领域的最重要的发明之一。 目前，PCR技术已广泛应用于生物学的各个领域，如基因工程、DNA测序、任遗传病的分类鉴定和诊断、肿瘤发生、诊断和治疗以及翻译学等。 复制（放射性dRNA终止符）＋荧光测序 3.3 天然重组与基因重组 天然重组包括同源、异源重组 同源重组—父母DNA重组减数分裂 基因重组——不同来源的DNA按人的设计和干预下定向拼接、组合。 应用 过程举例——超级细菌 第四节 RNA的生物合成 转录——以DNA为模板，按碱基配对原则（dA-U、dT-A、dG-C、dC-G)合成RNA链。 4.1过程 2.复合体甩掉δ亚基，随RNA聚合酶移动连续5`→3`转录RNA链。 基因中的外显子转录 4.2转录产物的“加工” 加工——使粗品RNA （没有功能）→成品 方法——剪切、拼接，修饰，添加甲基（rRNA) （剪切、拼接针对个别没能避免内含子转录的RNA） 第五节 逆转录（RNA指导的DNA合成） 某些病毒的生存方式。 如 HIV病毒、致癌病毒 治疗原理（鸡尾酒疗法） 阻止逆转录DNA 阻止病毒蛋白原切割 第六节 RNA的复制 个别噬菌体RNA病毒进入宿主细胞后，RNA以自身为模板，两次复制，形成病毒RNA 本章课堂复习思考题： 1、（山东大学 01 年 ）有关DNA 复制的说明中，错误的是（ ） A、半保留复制 B、半不连续复制 C、一般是定点开始双向等速复制 D、复制沿模板5’到3’ 方向进行 2、（中国科学院02年）在DNA 损伤修复中，哪一种修复可能导致高的变异率（ ） A、光修复 B、切除修复 C、重组修复 D、诱导修复 重要名词解释： 1、DDDP ;DDRP 等； 2、引发前体； 3、DNA复制体； 4、冈崎片段； 5、cDNA； 6、启动子； 7、分子生物中心法则； 8、半保留复制； 9、半不连续复制； 10、前导链（后随链） 11、逆转录； 12、SOS 反应 本章作业题： 1、（南京师大 2000年 ）简述原核生物DNA复制叉上进行的基本活动。 2、（南京师大 2001年） 比较原核生物与真核生物转录后加工的异同点。 3、（西南农大2000年）简要说明原核细胞中DNA复制与RNA的生物合成有何不同？ 4、（上海师大2000年）如果下面的DNA双螺旋从左向右进行转录，指出哪条链是有意链，并写出转录产物的顺序。 5’-A-T-C-C-G-A-G-C-T-A-A-3’ 3’-T-A-G-G-C-T-C-G-A-T-T-5’ 粗品RNA 5`加帽子 3`加尾巴 剪切(内含子对应部分)，拼接(外显子对应部分) 成熟的mRNA RNA穿出细胞核，指导蛋白质合成 转录 翻译 胞膜蛋白 双分子层 衣壳蛋白 RNA (病毒基因） 破坏免疫识别机制，引起免疫系统失效！ 逆转录酶 辅助T细胞-给病原体加识别标记的血液细胞 逆转录病毒DNA单链 单链病毒DNA复制互补链 异源重组 病毒RNA转录 免疫系统的敌我识别机制失效！ 切割形成病毒蛋白 组合成新病毒并攻击下一个目标 指导形成病毒蛋白原链 洁身自好预防为主 病毒RNA RNA互补链 新病毒RNA 复制 复制 翻译 病毒蛋白 RNA复制酶 组装成新病毒 * T T 紫外线(260nm) T(胸腺嘧啶）二聚体 双键打开 紫外光 T-T二聚体 可见光激活该酶 只有高等哺乳动物该功能退化掉了。 例 对细菌紫外诱变或杀灭时尽量保持暗环境。 光复活酶结合于