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一、动物细胞的培养过程 有关概念: 原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。 概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 四、单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体? 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 * 提问: 植物细胞工程常用的技术手段有哪些? 植物组织培养, 植物体细胞杂交 这些技术的理论基础: 植物细胞的全能性 动物细胞全能性如何? 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 动物细胞核移植 动物细胞工程常用技术 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 幼龄动物 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞 动物细胞培养的条件: 1.无菌无毒的环境 2.营养 3.温度和pH 4.气体环境 动物细胞培养技术的应用: 1.蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 2.健康细胞培养 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 3.细胞的生理、药理、病理研究 核移植 (难度高) 受体细胞:MⅡ期的卵母细胞 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 胚胎细胞核移植: 体细胞核移植: 细胞分化程度低,恢复全能性容易 卵细胞 C母绵羊子宫 A母绵羊 B母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 胚胎移植 早期胚胎 多莉羊 分娩 卵裂 融合后的卵细胞 细胞拆合技术 妊娠 多莉羊的培育过程 (MⅡ卵母细胞) 减数第二次分裂中期 去核的卵母细胞 供体细胞注入去核卵母细胞 受体细胞激活,完成减数分裂、发育 胚胎移植 1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程,找出操作过程的不同点? 多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞,而高产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核卵母细胞;多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞,而高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。 2、讨论分析上述哪一种措施更科学?并说明理由? 卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵细胞高,用它作受体更容易成功 将供体细胞注入受体细胞,使克隆动物更像供体动物,操作也方便 思考题 三、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 动物细胞融合(细胞杂交)-2个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 什么是抗体? 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗体的获得?
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