化妆品中利多卡因等7种物质的检测方法-中国食品药品检定研究院.doc

附件1 化妆品中利多卡因等7种物质的检测方法 （征求意见稿） 1 范围 2 方法提要 1 各物质的检出限、定量下限、检出浓度和最低定量浓度 名称 检出限（ng） 定量下限（ng） 检出浓度(μg/g) 最低定量浓度(μg/g) 普鲁卡因胺 10 25 40 100 普鲁卡因 8 20 32 80 氯普鲁卡因 10 25 40 100 苯佐卡因 8 20 32 80 利多卡因 10 25 40 100 丁卡因 10 25 40 100 辛可卡因 8 20 32 80 3 试剂 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T 6682规定的一级水。 3.1 甲醇，色谱纯。 3.2 乙腈，色谱纯。 3.3 正己烷，色谱纯。 3.4 三氯乙酸，优级纯。 3.5 甲酸，优级纯。 3.6 磷酸，相对密度=1.685，w（H3PO4）=85%，优级纯。 3.7 磷酸氢二钠。 3.8 氨水，优级纯，含量（NH3）= 25%～28%。 3.9 混合标准储备溶液：称取普鲁卡因胺、氯普鲁卡因、丁卡因、利多卡因标准品各0.05g（精确到0. 00001g），普鲁卡因、苯佐卡因、辛可卡因标准品各0.04g（精确到0. 00001g）置于同一50 mL容量瓶中，加甲醇（3.1）使溶解并定容至刻度，摇匀。 3.10 流动相的配制： 流动相A：0.01 moL/L Na2HPO4 水溶液H3PO4调H值至7.0 4 仪器 4.1 高效液相色谱仪，二极管阵列检测器。 4.2 天平。 4.3 超声波清洗仪 4.4 高速离心机 4.5 涡旋混合仪 4.6 pH计：精度0.01 4.7 固相萃取仪 5 分析步骤 5.1 样品处理 μm滤膜过滤，滤液作为待测溶液。 5.1.2 膏霜乳液类、液态油基类 5.1.2.1 膏霜乳液类 称取样品0.5g（精确到0.0001 g）于15mL离心管中，加入8mL 1%三氯乙酸，2mL乙腈，涡旋1min，5000r/min离心5min，上清液待固相萃取小柱净化。 5.1.2.2 液态油基类 称取样品0.5g（精确到0.0001 g）于15mL离心管中，加入2mL乙腈饱和正己烷溶液（乙腈∶正己烷=1∶1，超声30min后静置2h，取上层溶液），涡旋1min，超声10min，加入8mL 1%三氯乙酸，2mL乙腈，涡旋1min，5000r/min离心5min，下清液待固相萃取小柱净化。 5.1.2.3 净化过程 PCX固相萃取小柱依次用3mL甲醇、5mL 1%三氯乙酸进行活化。将待净化的样品清液流经小柱后，用3mL 1%甲酸甲醇溶液淋洗小柱，弃去淋洗液，再用10mL的5%氨水甲醇[取5mL氨水（3.8）加甲醇至100mL]洗脱，收集洗脱液，氮气吹干，用甲醇定容至10mL，经0.45μm滤膜过滤，滤液作为待测溶液。 5.2 系列浓度基质标准工作溶液制备 5.2.1 液态水基类、凝胶类 称取基质空白0.5g（精确到0.0001 g）5份，分别置于10mL具塞比色管中，分别加入混合标准储备溶液0.05mL、0.10mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL，按“5.1.1 样品处理”步骤进行前处理，即得。 5.2.2 膏霜乳液类、液态油基类 称取基质空白0.5 g（精确到0.0001 g）5份，分别置于15mL具塞比色管中，分别加入混合标准储备溶液0.05mL、0.10mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL，按“5.1.2 样品处理”步骤进行前处理，即得。 各物质基质标准工作溶液系列浓度见表2。 表2 各物质基质标准工作溶液系列浓度 名称 普鲁卡因胺 普鲁卡因 氯普鲁卡因 苯佐卡因 利多卡因 丁卡因 辛可卡因 系 列 浓 度 μg /mL 5 4 5 4 5 5 4 10 8 10 8 10 10 8 25 20 25 20 25 25 20 50 40 50 40 50 50 40 100 80 100 80 100 100 80 5.3 参考色谱条件 色谱柱：C18柱， 250 mm×4.6 mm，5μm 或等效色谱柱； 流动相梯度洗脱程序： 时间（min） V(流动相A）/% V(流动相B）/% 0 40 60 6 40 60 7 20 80 15 20 80 16 40 60 25 40 60 流速：1.0 mL/min； 检测波长：230nm； 柱温：30 ℃； 进样量：5 μL。 5.4 测定 6 分析结果的表述 6.1 计算 式中：ω—— 化妆品的质量分数，μg /g； ( —— 从校准曲线上查得的待测样液中的质量浓度，μg/L； V —— 样品定容体积，mL； m —— 样品，g； D —— 稀释倍数（不稀释则取1）。80.6%~11