实验ⅱ.ppt

上次实验课总结 实验一 显微镜的结构、使用和显微测量 实验二 细胞计数 实验Ⅱ 实验三 动物细胞基本形态观察 实验四 细胞膜通透性的观察 实验四、细胞膜通透性的观察 实验目的 　1. 了解细胞膜对物质通透性的一般规律 　2. 了解溶血现象及其发生机制 实验材料： 10%羊血细胞悬液 实验用品 试管、试管架、吸管 溶液（各3ml） 0.17M 氯化钠 0.17M 氯化铵 0.32M 葡萄糖 0.32M 甘油 蒸馏水 ＃ 以上溶液除蒸馏水外，均为等渗液。 实验原理 　　　细胞膜是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞。 　　　当红细胞被放入数种等渗溶液中时，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的溶质不能渗入。渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，导致水分进入细胞，引起溶血。不同溶质渗入速度不同，溶血时间也就不同。 红细胞膨胀与收缩 实 验 步 骤 摇匀动物红细胞悬液 取0.3ml红细胞悬液加到3ml蒸馏水试管中，颠倒混匀，观察溶血现象，记录溶血时间。 依次移加0.3ml红细胞悬液到四种等渗液中，颠倒混匀，观察是否溶血，记录溶血时间。 注 意 事 项 若透过试管壁，实验指导上的字迹变得清晰，则意味着发生了溶血。 移取前摇匀细胞悬液，以免浓度不均； 操作标准要一致 细胞悬液移取量 颠倒混匀的次数 判断溶血的标准…… 实验报告 实验三、动物细胞基本形态观察 实验目的： 1.熟悉捣髓法处死蟾蜍的方法； 2.观察不同细胞的基本形态； 3.掌握不同细胞临时制片的制作方法； 4.掌握生物绘图方法。 实验用品 材料和标本：蟾蜍一只 器材和仪器：光学显微镜、载片若干（浸于酒精中，用时取出晾干，用毕后洗净再浸到酒精中）、盖片若干、吸水纸、手术器材一套(六件）、蜡盘、小平皿、大头针、消毒牙签、推片、纱布。 试剂：1％甲苯胺蓝、1％甲基兰、Ringer氏液 （两栖类用）、生理盐水 理论基础 细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点，例如：具有收缩机能的肌细胞伸展为细长形；具有感受刺激和传导冲动机能的神经细胞有长短不一的树枝状突起；游离的血细胞为圆形、椭圆形或圆饼形。 不论细胞的形状如何，细胞的结构一般分为细胞膜、细胞质和细胞核三大部分。但也有例外。例如：哺乳类红细胞成熟时细胞核消失。 本次实验制备、观察如下细胞： 生物绘图要求： 实验报告 按生物绘图要求分别绘制所观察的6种细胞中的4种并注明基本结构（5分）。 实 验 内 容 1. 捣髓法处死蟾蜍 左手持蛙，将其腹面朝向手心，前肢夹在食指和中指之间，后肢夹在无名指和小指之间，并用拇指按压蟾蜍头部使之下俯； 将解剖针刺入枕骨大孔，先向前刺入颅腔，搅动捣毁脑，再向后捣毁脊髓，使蛙全身肌肉处于松弛瘫软状态。 2.用大头针将蟾蜍四肢钉于蜡盘上，剪开腹部的皮肤、腹腔和胸腔，暴露心脏，将动脉干或心室剪一小口。 晾干后镜检 （二）人血涂片的制备与观察（选做） 取人血一滴，制片方法同上。显微镜观察可见人红细胞为凹圆盘形，无核。白细胞数目少，为圆形。 （三）蟾蜍肝脏压片的制备与观察 方法： 1. 剪开蟾蜍腹腔，取一小块肝（约2～3mm3）放 在小平皿内，滴Ringer氏液，用镊子轻压将肝 中的血挤出。 2. 将肝组织放在载片（事先晾干）上，再取一张 载片错开放于肝组织上，用拇指垂直用力挤压。 3. 掰开两张载片即可得到压片。在压片上滴一滴 甲基兰染液，染色5-10分钟。 4. 盖上盖片，吸去多余染液，镜检。 结果：肝细胞紧密排列，挤成多角形；核染成兰色。 染色较深（深紫色）的小细胞是神经胶质细胞；染成蓝紫色、体积较大、有多个突起的细胞是脊髓前角运动神经细胞，胞体呈三角形或星形，中央有一个圆形细胞核，内有一个核仁。 （五）蟾蜍骨骼肌细胞的剥离与观察 方法：1. 剪开蟾蜍腿部皮肤,在靠近躯干部取1cm长 肌肉，放在载片上。 2. 一手拿镊子，一手拿解剖针，沿肌纤维方 向剥离肌肉块成肌束, 继续剥离，可得到 很细的肌纤维(肌细胞)。 剥得越细越便于观察。 3. 尽可能拉直肌纤维，在显微镜下观察。 结果：肌细胞为细长形，可见折光不同的横纹， 每个肌细胞有多个核，分布于细胞的周边。 （六）人口腔上皮粘膜细胞临时制片 取载玻片，滴一滴生理盐水 刮取口腔上皮细胞涂于生理盐水中 染色：加入甲苯胺蓝后盖好盖玻片，将多余的水吸干净。(盖片表面不能有染液) 4. 观察 口腔上皮细胞为扁平的不规则多边形细胞，内部可见染成蓝紫色的细胞核，细胞质淡染，可见大小不