《HIV、梅毒检测课件.ppt

HIV抗体、梅毒筛查技术 平昌疾控 李勇 2011.04.21 HIV抗体筛查依据：《全国艾滋病检测技术规范》（2009年修订版） 《全国艾滋病检测工作管理办法》 艾滋病检测实验室的管理 国家对艾滋病检测实验室实行分类管理，按照实验室的职能、开展检测工作的性质及范围共分三类实验室，分别是艾滋病参比实验室、艾滋病检测确证实验室、艾滋病检测筛查实验室（包括：艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点） 。 艾滋病检测点的申请和验收程序 （一）申请设立艾滋病检测点的机构或单位应填写“艾滋病检测点资格审批申请表”（附件2），向当地区县卫生行政部门提出申请，经区县卫生行政部门批准后报市（州）卫生行政部门审批。 （二）艾滋病检测点基本标准 1.人员条件：至少由2名经过市（州）级以上艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。 2.建筑条件：需有艾滋病检测区域或专用实验台，能开展简便、快速检测。 3.设备条件：需配备快速试验所必须的物品，包括加样器、普通冰箱、操作环境温度控制设备、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。 （三）对符合规定、材料齐全的申请者，由所在市（州）卫生行政部门指定2人以上人员组成的艾滋病检测点评审专家组（专家组成员必须经过省级以上艾滋病检测相关培训）根据本方案艾滋病检测点基本标准对申报单位进行现场验收，同时使用5份盲样对其进行实验操作及结果判读进行现场操作考核。 （四）专家组对通过现场验收的检测点报请市（州）卫生行政部门批准及备案。 （五）市（州）级卫生行政部门对通过验收者发出批复通知，同时抄送省卫生厅、省疾病预防控制中心和市（州）疾病预防控制中心，未通过验收者整改后可重新提出申请。 基 本 概 念 HIV形态与结构 HIV呈球形，直径100-120nm 内含RNA分子及酶（逆转录酶、整合酶喝蛋白酶） 外层有包膜，膜上为突起插入，突起由糖蛋白（gp120）和跨膜蛋白（gp41）以共价键连接而成。 HIV基因：3个结构基因和6个调节基因 3个结构基因：env、gag、pol表达的蛋白： env---gp160、 gp120、gp41 gag---p55、p24、p17 pol---p66、p51、p31  HIV感染机理（一） HIV病毒侵入人体后，其表面糖蛋白gp120与细胞表面受体蛋白CD4以高亲和力结合，吸附到宿主细胞上；gp120再与宿主细胞表面辅助受体相互作用，使病毒与宿主细胞膜更接近；gp41产生一系列构象变化，其N端的融合肽片段插入宿主细胞膜，导致病毒包膜与细胞膜的最终融合，病毒RNA进入细胞。 在HIV感染后，最先能够监测到病毒RNA、然后是p24抗原，最后是抗体。 HIV感染机理 （二） 感染HIV后，机体针对HIV基因编码的抗原性物质产生相应抗体，在临床上具有重要诊断学意义的主要是对抗结构基因编码抗原(如gpl60，gpl20，gp41，p66，p55，p51，p31，p24，p17等)的抗体。 由于个体差异、各种病毒蛋白的浓度和抗原性强弱不同及不同个体对不同抗原成分的反应性均有所不同，因此相应抗体的产生时间和不同个体对相同抗原成分的免疫应答强度等存在一定差别，此外，检测方法和使用试剂的敏感性不同对HIV抗体的检出时间产生一定影响。在感染HIV后，患者血清中最先出现p24抗原，继之，各种HIV抗原可达到高峰；2-6周后，随着HIV-l抗体产生及浓度的不断增加，HIV抗原渐趋降低或检测不出。临床通用ELISA、免疫印迹法（WB）和目前开始推广的快速诊断法检测HIV抗体。 HIV感染的主要检测方法（一） 目前检测HIV的方法很多，总体来说可以分为抗体检测和病毒检测两大类。病毒检测包括细胞培养(病毒分离)、p24抗原检测和病毒核酸检测。 早期对HIV的诊断主要是通过血清学试验检测抗HIV的抗体,间接地诊断HIV感染。 近几年，分子生物学方法不断被应用到HIV的检测中，HIV的实验室诊断方法取得了很大的进展，核酸检测已经成为了HIV实验室诊断的发展方向。 HIV感染窗口期 窗口期的问题？抗体通常是在感染后3～8周能够被检测出来。95%在三个月可以检测出抗体。 在窗口期，病毒抗体不能被检出，但可以检测到病毒相关抗原或分离病毒。抗原能够在个体感染后先于血清转化2～18 d被检测到。因此，在血清转化期通过检测p24抗原作为早期辅助诊断HIV感染的一种方法。 HIV感染的主要检测方法（二）--HIV抗体检测 检测抗-HIV抗体是HIV/AIDS诊断的一项重要指标，抗-HIV抗体测定作为血清学诊断要求准确、可靠，必须经初筛、