《第七章发酵工程在现代生物技术中的应用.ppt

二、培养基的灭菌方法 （1）分批灭菌 分批灭菌是在每批培养基全部流入发酵罐后，就在罐内通入蒸汽加热至灭菌温度，维持一定时间，再冷却到接种温度。实罐灭菌时，发酵罐与培养基一起灭菌。 不需要附属设备，操作简便，常用的灭菌方法 加热和冷却时间较长，营养随时间降低，罐利用率低；不能采用高温快速灭菌工艺。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 发酵罐溶积越大，加热冷却时间越长 T总=t1+t2+t3 式中t1、t2、t3分别为加热、维持、冷却所需要的时间 其他灭菌设备一般采用蒸汽灭菌，如设备十分耐压，则可采用较高的温度，但必须注意设备内部的凹处及露出的小配管等蒸汽不能到达的部位。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 发酵工程在现代生物技术中的应用 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 生物技术：应用自然学和工程学的原理，依靠生物作用剂的作用将生物物料进行加工以提供产品和为社会服务的技术。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 20世纪70年代以后，以DNA重组技术的建立为标志，形成了一个以基因工程为主导，发酵工程为中心，包括细胞工程和酶工程的现代生物技术体系。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 第一节 基因工程菌发酵 一、基因工程技术 通过对核酸分子的插入、拼接和重组而实现遗传物质的重新组合，借助载体将重组的目的基因转移新的宿主细胞体系，并使目的基因在新的宿主体系细胞中进行复制扩增和表达所需的目的产物。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 基因工程菌的制备 一、目的基因的制备 1.鸟枪法 选用合适的内切酶，在Mg2+的激活下，切开供体DNA链获得目的基因，根据酶切末端特点分为a、b两类。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 基因工程菌的制备 2.cDNA法 又称反转录法，从细胞内提取目的基因的mRNA，在反转录酶的作用下，以mRNA反转录互补的cDNA。 3.人工合成 在电脑控制下通过合成仪合成获得的DNA片段。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 二、载体的准备 目前常用的基因克隆载体： 1.质粒：严密性质粒和松弛型质粒 2.pBR322和pUC：去除原有质粒的非必须功能，引入选择标记和在适宜的位置设置限制酶单一切点。 3.噬菌体载体 有λ噬菌体和M13噬菌体 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspo