《细胞培养的基本方法.ppt

细胞培养的基本方法 细胞培养的基本概念 细胞培养的目的与用途 细胞培养主要的设施器材 细胞培养的条件 设施、器材、试剂实物图 培养细胞的分类 原代培养 原代消化培养法 原代组织块培养法 细胞的传代 细胞的传代 细胞的传代 细胞的换液 细胞的冻存 细胞的冻存 细胞冻存的注意事项： 细胞的复苏 细胞的复苏 细胞复苏的注意事项 细胞污染时的处理 其他注意事项 Thank You! * * * L/O/G/O Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2 细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内 环境下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一 一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞， 也可以是细胞群。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2 一、基础研究 (1) 药物作用机理 (2) 基因功能 (3) 疾病发生机理 二、科学研究: (1) 新药筛选:如药效研究,中药有效成分筛选等. (2) 疫苗研究与开发:如肝炎疫苗, 艾滋病疫苗，肿瘤疫苗等. (3) 基因工程药物与细胞工程药物的研究与开发 (4) 单克隆抗体制备 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2 设施：超净台、恒温培养箱、倒置显微镜、液氮储存罐、冰柜、恒温 水浴槽、离心机、压力蒸汽消毒器。 器材： 一、玻璃器材 玻璃培养皿、刻度吸管、离心管、培养瓶等，（现已较少使用）。???????????????????????????????????????????? 二、塑料器材 多孔培养板（6,12,24,48,96）、培养皿、培养瓶、离心管、冻存管。 三、橡皮器材 橡皮制品（最好是硅制品）做各种瓶或试管的塞子、盖子。 四、金属器材 剪刀、镊子、手术刀、解剖刀、血管钳、组织镊、眼科镊及各种型号针头 五、其他物品 纱布、注射器、针头、滤头 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. （1）适宜的温度和PH 37℃，pH7.2~7.4。 （2）气体环境 95%空气+5% CO2; 适宜的湿度（无菌水不能干掉）。 （CO2：细胞生长所必需的成分, pH值维持，最低不能低于1%。） （3）营养物质 N 源、C源、无机盐、维生素、H2O，细胞培养基中含有。 常用的细胞培养基：DMEM，RPMI-1640，BME，M199 等。 （4）无菌条件 紫外消毒、空气过滤、无菌滤头，高压灭菌、严格操作。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 按照是否贴壁： 贴壁细胞：大多数属此类细胞，如肿瘤细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、神经胶质 细胞等。 悬浮细胞：主要为取自血、骨髓、脾的细胞，如白血病细胞。 按照传代次数： 原代细胞：即从体内取出组织接种培养而未经传代的细胞。（也有人把传代10次之 内的细胞统称为原代细胞。） 细胞系：指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。如HeLa细胞、 CHO