《荧光蛋白.ppt

1 声明 这是我在借鉴了一个网友的ppt后而做成的，加了一些东西，修饰了一下，谢谢那位网友！ 主讲人：梦还在 学号：2010501304 居住于北美西海岸附近的水母Aequorea Victoria(a)。它的发光器官位于“伞状结构”的边缘（b和c）。 总结三位科学家的杰出贡献 Osamu Shimomura是首位从水母（Aequorea victoria ）中分离出GFP的科学家，是他发现了该蛋白在紫外线下会发出明亮的绿光。 Martin Chalfie则证明了GFP在作为多种生物学现象发光遗传标记方面的应用价值。 钱永健为我们阐明了GFP发光的机制，并且发现了除绿色之外可用于标记的其它颜色。他对细胞生物学和神经生物学领域的贡献具有划时代的意义。他的多色荧光蛋白标记技术让科学家能够用不同颜色对多个蛋白和细胞进行标记，从而实现了同时对多个生物学过程进行追踪。 趋势 图a显示的是小鼠体内两种肿瘤的全身成像结。图b显示的则是将GFP标记的肿瘤移植到小鼠骨中的全身成像。 图a，显示的是GFP标记的肿瘤被移植到小鼠的大肠，在蓝光下的全身成像。图b为同一个动物被剖开后的全身成像。对比a和b可见，全身成像的精确性非常好。 荧光蛋白的始祖 —— GFP 4 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 5 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 6 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 马丁?查尔非就考虑只用它的编码区域来表达。 1993年，他用PCR的方法扩增了GFP的编码区，将它克隆到表达载体中，紫外光或者蓝光激发后，大肠杆菌和线虫细胞内均产生了很美妙的绿色荧光。 1994年在美国《科学》杂志上发表《作为基因标识的绿色荧光蛋白》一文，尽管正文只有一页，却标志绿色荧光蛋白投入实验室应用。 7 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. GFP由238个氨基酸分子组成，分子量为26.9 kDa。 来源于水母的野生型GFP在395 nm和475 nm分别有主要和次要的激发峰，它的发射峰在509 nm，处于可见光谱的绿色区域；来源于海肾的GFP只在498 nm有单个激发峰。 GFP是典型的β桶形结构，包含β折叠和α螺旋，将荧光基团包含在其中。严密的桶形结构保护着荧光基团，防止它被周围环境淬灭。 8 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 9 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 野生型GFP能发出很绚丽的荧光 1996年Remington小组最先在《Science》上发布了GFP的S65T突变体的晶体结构。 一个月后，Phillips小组也在《Nature Biotech》上发布了野生型的GFP结构。 正是这些晶体结构的探明，才使人们更好地了解发光基团的组成，以及与周围残基的相互作用。研究人员通过定点或随机突变，不断地改造这些残基，得到了我们今天使用的GFP衍生物。 10 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 最值得赞叹的就是