一种快速鉴定雉科鸟类的性别的方法要素.ppt

一种快速鉴定雉科鸟类的性别的方法 作者：苏浩宇 成都市田家炳中学 2013.4.12 课题背景 在参观成都市观鸟月的活动中，我发现动物园中很多雉科鸟类的性状非常相近，很难用肉眼辨别它们的性别，尤其是这些鸟类在野外要对他们进行性别辨别将是一件很困难的事情。 血雉 ？ 这些体态相近，羽毛颜色相似的鸟儿，如何快速分辨它们的性别？ 单态性鸟：即雌雄同型，无论是幼鸟还是成鸟都很难从外观形态或其他行为上区分雌雄性别的鸟类，如鹌鹑。 鹌鹑 实验目的及方法 　传统的鸟类性鉴定的方法：　 生殖器直接观察法　 外科手术法 染色体观察法 分子生物学方法： RAPD鉴定 EE0.6基因鉴定 CHD基因鉴定 鸟类的性别是ZW型，其中雄性为ZZ, 雌性为ZW。 ZW染色体上的基因可以很好区分雌雄个体的性别。 其中CHD基因是一个良好的区分鸟类性别的分子标记。CHD基因在鸟类染色体中有两个同源拷贝CHD-W和CHD-Z，♂中只有CHD-Z，而♀类中同时具有CHD-W和CHD-Z。且CHD-Z基因的长度要小于CHD-W。 由此，我们就可以通过因长度片段来简单准确的鉴别出雉科鸟类的性别。 实验步骤 取少量雉科鸟类羽毛或其他脱落物 利用得到的脱落物进行DNA提取 利用PCR技术及引物扩增出目标基因 通过电泳实验得到实验结果 DNA提取实验 在此实验中，我们搜集了鸟类脱落的羽毛或者脱落物，进行了DNA的提取。因此，此手段并未对目标鸟类造成实质性的伤害，对鸟类的正常生理活动，繁殖不会造成伤害 PCR实验原理及操作过程 PCR(聚合酶链式反应）是一种可以不断合成目标DNA片段的反应 94℃，DNA变性解旋，由单链变为双链 55℃，褪火，在此温度下引物与DNA单链结合。 72℃，Taq酶最适温度，在此温度下酶活性提高，进行从引物开始的DNA延伸。 重复30~35次，就可以得到大量的目标基因。 电泳实验及结果 1-8号DNA样本代表8个雉科鸟类个体， 1白冠长尾雉♂：2 白冠长尾雉♀； 3 红腹锦鸡♂；4 红腹锦鸡♀； 5 勺鸡♂；6 勺鸡♀； 7 白马鸡♂；8 白马鸡♀。 结论： 通过我们的实验结果，我们可以100%准确地鉴定这些雉科鸟类的性别，与我们样本记录完全一致。此方法，快速简便，在一般实验室和保护单位都可以开展本实验。 本实验创新点： 雉科鸟类的观察通常采用肉眼进行，但是一些雉科鸟类颜色非常鲜艳，且雌雄很难区分。因此，我们采用分子生物学的方法可以很快速准确判断鸟类的性别，比肉眼的观察要准确。 2. 我们鉴定来自动物园雉科鸟类性别，可以为动物园或者保护区保育员提供可靠的关于雉科鸟类配种、繁育方面的技术支持。成本较低，一般实验室都可以进行操作！ 3. 我们在前人研究基础之上重新设计了用于扩增雉科鸟类CHD基因的引物，这一对引物比之前的要短，且更稳定，易于扩增和检测，且比之前其他的鉴定方法，比如RAPD等要更为准确和简单，省时省力！