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基底膜 - JONES 六胺银 目的：用于鉴别肾小球的基底膜。是肾活检组织的常规染色。 原理：基底膜组织的粘多糖成份经高碘酸氧化后暴露醛基，醛基能把六胺银还原成可见的金属银。 对照：正常肾小球组织。 固定方法：酒精Bouins液, 10%甲醛 技术：石蜡切片1μm-2μm 设备：酸洗玻璃器皿；染色缸(不能使用带有金属边)，量筒，Teflon 镊子(非金属)，微波炉，水浴箱。 试剂： 1% 高碘酸： 高碘酸 5.0 gm 蒸馏水 500.0 ml 混合溶解，标签，日期和签名。保存期6个月。 警告：避免接触和吸入 六胺银原液： 3% 六次甲基四胺 400.0 ml 5% 硝酸银 20.0 ml 使用酸液清洗玻璃器皿。保存于冰箱，保存期6个月。 警告：腐蚀性，可能致癌。 5% 硼砂液： 四硼砂钠 5.0 gm 蒸馏水 100.0 ml 使用酸液清洗玻璃器皿。保存于冰箱，保存期6个月。 六胺银工作液： 六胺银原液 50.0 ml 5% 硼砂 6.0 ml 新鲜配制。用后丢弃。 警告：腐蚀性，刺激性。 0.2% 氯化金： 1% 氯化金 1.0 ml 蒸馏水 50.0 ml 使用酸液清洗玻璃器皿。保存于冰箱，保存期6个月。 警告：避免接触和吸入。 5% Hypo: 详见备用液。 常规HE染液。 安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。保持所有打开盖的热溶液于通风橱中。避免接触和吸入染料和化学品。 硝酸银：剧烈的皮肤和眼睛刺激，氧化剂。摄入将导致严重的胃肠道不适。可能致癌：可疑的肿瘤发生因素。 硫代硫酸钠：摄入毒性。能引起胃刺激，接触对皮肤、眼睛和呼吸系统有刺激性。 亮绿SF Yellowish：可能致癌。 程序： 1. 常规脱蜡至蒸馏水。 2. 1% 高碘酸，60°C水浴 15 minutes。 3. 蒸馏水洗3次。 4. *六胺银工作液和一缸蒸馏水：微波高火60 seconds，先将玻片放入热的蒸馏水中。搅拌银液，再放入玻片。 5. 将银液染色缸放入 60°C 水浴, 每 2- 5 minutes检查一次。玻片置于银液中直至银液呈亮棕色。镜检见黑色的基底膜。 6. 蒸馏水稍洗。 7. 0.2% 氯化金，20 dips, 直至灰色。 8. 蒸馏水稍洗。 9. 5% Hypo, 1 minute。 10. 水洗。 11.苏木精复染1-3 minutes。 12. 酸分化，水冲洗蓝化。 13. 伊红稍染。 14. 脱水，透明和封固。 *常规方法：4. 60°C 水浴1 hour 或直至基底膜变黑色。 结果： 基底膜：黑色 核：蓝色 背景：粉红色 注意：如果组织过度染色，可浸入(0.05 gm/50 ml water)铁氰化钾液中洗淡(溶液应为浅黄色)。 参考文献： Sheehan D,Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp 186-187, Battelle Press, Ohio AFIP MANUAL, pp 97 Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech PROCEDURE CARD JONES六胺银-基底膜 对照：正常肾小球组织。 程序： 1. 常规脱蜡至蒸馏水。 2. 1% 高碘酸，60°C水浴 15 minutes。 3. 蒸馏水洗3次。 4. *六胺银工作液和一缸蒸馏水：微波高火60 seconds，先将玻片放入热的蒸馏水中。搅拌银液，再放入玻片。 5. 将银液染色缸放入 60°C 水浴, 每 2- 5 minutes检查一次。玻片置于银液中直至银液呈亮棕色。镜检见黑色的基底膜。 6. 蒸馏水稍洗。 7. 0.2% 氯化金，20 dips, 直至灰色。 8. 蒸馏水稍洗。 9. 5% Hypo, 1 minute。 10. 水洗。 11.苏木精复染1-3 minutes。 12. 酸分化，水冲洗蓝化。 13. 伊红稍染。 14. 脱水，透明和封固。 *常规方法：4. 置于60°C 水浴1 hour 或直至基底膜变黑色。 结果： 基底膜：黑色 核：蓝色 背景：粉红色 1% 高碘酸： 高碘酸 5.0 gm 蒸馏水 500.0 ml 混合溶解，标签，日期和签名。保存期6个月。 警告：避免接触和吸入 六胺银原液： 3% 六次甲基四胺 400.0 ml 5% 硝酸银 20.0