分解纤维素的微生物的分离上课用要素.ppt

【资料三】刚果红染色法 方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应 方法二：在倒平板时就加入刚果红 漂洗作用,氯化钠可以使结合不牢的刚果红洗去,这样就留下大大小小的透明圈,大的透明圈当然分解纤维素的能就强。 方法一中NaCl溶液的作用？ 培养基组成 提供的主要营养物质 CMC-Na 5~10g 碳源 酵母膏 1g 碳源、氮源、生长因子 KH2PO4 0.25g 无机盐 土豆汁 100mL 碳源、生长因子 琼脂 15g 凝固剂 上述物质溶解后，加蒸馏水定容至1000mL 氢元素、氧元素 鉴别纤维素分解菌的培养基 (水溶性羧甲基纤维素钠) 染色法 优点 缺点 颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 操作繁琐 刚果红会使菌落之间发生混杂 操作简便 不存在菌落混杂问题 产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈， 有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。 思考：这两种方法各有哪些优点与不足 方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应 方法二：在倒平板时就加入刚果红 纯化培养:挑选产生透明圈的菌落 挑取产生明显的透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在300C－370C培养，可获得纯培养。 练一练 1、在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合下列哪 一生物学观点？（ ） A.生物结构与功能相适应的观点 B.生物结构与功能整体性观点 C.生物与环境相适应的观点 D.生物发展进化的观点 2、从土壤中分离获得某种微生物的步骤是（ ） ①土壤取样 ②梯度稀释 ③选择培养 ④菌悬液涂布平板 ⑤挑选出单个菌落 A、 ①②③④⑤ B、①③②④⑤ C、 ①②④③⑤ D、①④②③⑤ 3、有关选择培养正确的叙述是（ ） A、可以增加纤维素分解菌的浓度 B、可以减少纤维素分解菌的浓度 C、所用培养基是固体培养基 D、所用培养基是平板培养基 C B A 四、结果分析与评价 1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落 对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作合格。 如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。 2.分离的结果是否一致 由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量，因此最容易分离得到的是细菌。但由于所取土样的环境不同，不同同学也可能得到真菌和放线菌等不同的分离结果。 教学目标: 1、知道纤维素酶的种类及作用 2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维 素的微生物的实验方法 一.基础知识 ㈠.纤维素与纤维素酶 1.纤维素 棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。 纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。 纤维素可用于纺织工业，可造纸； 纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。 2.纤维素酶 纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶(外切酶)、CX酶(内切酶)和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 纤维二糖 C1酶、Cx酶 葡萄糖苷酶 葡萄糖 纤维素 3.纤维素的分解： 土壤中某些微生物(真菌、放线菌及细菌 )能够产生纤维素酶,把纤维素分解为葡萄糖，后再利用。 下列生物能分解纤维素的是（ ） ①人 ②兔 ③牛 ④蘑菇 ⑤纤维杆菌 A.①②③④⑤ B.②③⑤ C.②③④⑤ D.③⑤ C 兔、牛等草食性动物的肠胃中的共生微生物可合成纤维素酶分解纤维素。 蘑菇、纤维杆菌能分泌纤维素酶分解纤维素； 人不能消化纤维素。 在一支试管中添加纤维素酶， 另一支试管不添加纤维素酶； 〖思考1〗P27的小实验是如何构成对照的？ 滤纸崩溃法 4、纤维素酶活性的测定实验： 方法：滤纸崩溃法 （二）纤维素分解菌的筛选 1、筛选纤维素分解菌的方法______________。优点：该方法可以通过________反应直接筛选。 刚果红染色法 颜色 2、其原理是：刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后， 红色复合物无法形成，出现以_____________ 为中心的________，可以通过___________________________ 来筛选纤