2.1 微生物的实验室培养.ppt

一、基础知识 微生物: 1.特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. 细菌的构造 基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质（细胞质中核糖体、质粒、贮藏性颗粒等）、拟核。 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 ㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 ㈡纯化大肠杆菌： ⑴平板划线法： 1.接种： 二、实验操作 分散成单个细胞, 形成单个菌落 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 * * 到目前为止， 几十项诺贝尔生理学和医学奖，化学奖 都与微生物有关 2、微生物的类群 原生生物： 真菌: 病毒: 无细胞结构 真核细胞 原核细胞 原核生物: 如酵母菌 如草履虫、单细胞藻类等 图1-3 细菌的结构 特殊结构：鞭毛、荚膜、芽孢等 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌. 单个 或少数菌体 2.特征： 大小、形状、光泽度、 颜色、透明度等。 3.功能： 1.定义： 菌 落: 鉴定菌种的重要依据 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 课题1 微生物的实验室培养 专题2 :微生物的培养与应用 1.何为培养基？不同的培养基有不同的配方，但是其基本成分都相同，都包括哪些营养成分？有何作用？请举例说明。 2.无菌技术包括哪些方面？消毒和灭菌的区别？常用的消毒方法有哪些？常用的灭菌方法有哪些？ 自主学习: 培养基和无菌技术 一、基础知识： （一）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 （一）培养基： 微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分： 思考：微生物“吃”什么？ 碳源、氮源、无机盐、生长因子、水 ⑴碳源 无机碳源： 有机碳源： CO2、NaHCO3 、CaCO3 葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉和纤维素等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源： 有机氮源： 铵盐、硝酸盐等 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注：①微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。 ②含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 不同的微生物往往需要采用不同的培养基 不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。 一、基础知识： （一）培养基 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。 （2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。 2.培养基的类型 分离导入了目的基因的受体细胞 加入青霉素等抗生素 分离固氮菌 不加氮源 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入青霉素 分离杂交瘤细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷 分离自养型微生物 不加含碳有机物的无碳培养基 分离金黄色葡萄球菌 加入高浓度食盐 应用 培养基 耐高温需保持干燥的 物品，16