4微生物的实验室培养.ppt

菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 二. 无菌技术 思考： 1. 什么是无菌技术？包括哪些方面？ 2. 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？（P15旁栏思考） 3. 消毒和灭菌有何不同？ 4. 常用的消毒和灭菌方法有哪些？ 三. 实验操作---大肠杆菌的纯化培养 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算－称量－溶化－灭菌－倒平板 （二）纯化大肠杆菌 最常用的接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 结果分析与评价 课题延伸 * * 专题2 :微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 微生物的实验室培养条件： （1）合适的营养和环境条件 （2）确保其他微生物无法混入 一. 培养基 1. 概念： 按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2. 培养基种类： 液体培养基： 固体培养基： 用途应用微生物分离、鉴定、 计数和菌种保存等方面 用途工业生产 3. 成分： 水、无机盐、碳源、氮源 +满足微生物对pH、特殊营养物质、氧气的要求 碳源：凡是为微生物提供所需碳元素的营养物质 无机碳：二氧化碳、碳酸氢钠等 有机碳：糖类、脂肪石油等 氮源：凡是为微生物提供所需氮元素的营养物质 无机氮源：氮气、氨、硝酸盐等 有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨 基酸等 菌落 细菌的菌落特征因种而异 无菌技术：泛指培养微生物操作中，所有防 止杂菌污染的方法。 无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 3. 常用的消毒方法： 煮沸消毒法，巴氏消毒法，紫外线或化学药剂消毒法 常用的灭菌方法： 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 ：100kPa 121℃ 15-30min 判断下列各项是否需要消毒或灭菌。如需要，选择合适方法。 （1）豆浆 （2）游泳池 （3）超净工作台 （4）玻棒、试管、吸管、锥形瓶 （5）培养细菌用的培养皿 （6）无菌水 （7）牛肉膏蛋白胨培养基 （8）接种环、接种针（9）实验操作者的双手 牛奶 接种室、接种箱或超净工作台 接种工具，接种环、接种针或其他金属用具 玻璃器皿（吸管、培养皿） 定义 常用方法 微生物培养和组培中的应用 消毒 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物 煮沸 玻璃仪器 紫外线 实验室、操作台、衣物等 酒精溶液 手、外植体等 次氯酸钠溶液等 外植体 灭菌 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 高压蒸汽 培养基、玻璃仪器、棉塞、牛皮纸等 灼烧 接种环、涂布器 干热 玻璃仪器 2、消毒和灭菌，什么时候需要消毒，什么时候需要灭菌？ （冷却至50℃） 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 菌种的保存 1、临时保藏法： 对象： 温度： 缺点： 2、甘油管藏法： 对象： 温度： （P20） 频繁使用的菌种 4℃（冰箱） 容易被污染或 产生变异 长期保存的菌种 -20℃（冷冻箱） 返回 接种环 接种针 返回 倒平板 讨论1，2 讨论3，4 平板划线法 讨论2，3