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核酸的酶促降解 (一) 核酸酶 外切核酸酶对核酸的水解位点 内切核酸酶对RNA的水解位点示意图 (二) 限制性内切酶 常用的DNA限制性内切酶的专一性 限制性内切酶类型 限制性内切酶的命名和意义 遗传信息传递的中心法则 DNA的半保留复制的概念 (原核生物DNA聚合反应有关的酶类) Catalytic Mechanism of DNA Pol (DNA聚合酶的作用机理) 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ全酶的结构和功能 大肠杆菌三种DNA聚合酶比较 真核和原核DNA细胞复制比较 连接酶连接切口 4. telomerase（端粒酶） 端粒合成的一种模型 原核细胞DNA的半不连续复制复制过程 DNA的双向和单向复制 大肠杆菌复制起点成串排列的重复序列 大肠杆菌复制体结构示意图 大肠杆菌染色体复制的终止 DNA聚合酶的校对功能 DNA聚合酶的校对功能 起始时以RNA作为引物的作用 三、 DNA的突变 DNA突变的类型 SOS反应的机制 六、DNA的遗传重组 转录的概念和DNA的有义链和反义链 RNA聚合酶的反应（线条式） E.coli RNA聚合酶各亚基的大小与功能 噬菌体T3和T7的RNA聚合酶 RNA合成过程 RNA 链 的 延 伸 大肠杆菌两类终止子的回文结构 RNA的拼接方式 RNA编辑的不同类型和分布 （四）RNA生物功能的多样性 （五）RNA的降解 四、RNA生物合成的抑制剂 DNA和RNA合成的比较 转录起始点（start point）为+1，位于它上游的序列为负数，位于它下游的序列为正数，没有零。 （2）RNA聚合酶对启动子的识别、结合和起始复合物的形成 RNA合成不需要引物，按照DNA中一条链的碱基序列选择1st and 2nd 核苷三磷酸，合成第一个磷酸二酯键，RNA链上参入的第一个核苷酸通常是嘌呤，因此新生RNA的5′端通常是pppA or pppG。 转录起始后，σ因子就从起始复合物中解离。 σ因子释放后，进入链的延长阶段，核心酶 的移动方向沿DNA 的3′→5′方向 3.链的延长 3′ 5′ RNA-DNA杂交螺旋 聚合酶的移动方向 新生RNA 复链 解链 编码链 模板链 延长部位 DNA RNA链的合成方向5′→3′ RNA合成的速度每秒种40个核苷酸，与蛋白质合成的速度相近（15个aa/sec），但比DNA复制的速度（800bp/sec）要慢得多。RNA聚合酶在DNA分子上的运动不是匀速的，在经过富含GC对的序列8至10个核苷酸后，会发生一次暂停，这与转录的终止有关。 当核心酶沿模板3′→5′方向移动到终止信号区域时，转录就终止，提供终止信号的DNA序列称 终止子。  终止有2种类型： 　不依赖ρ因子的终止，依赖于ρ因子的终止。 4.链的终止 不依赖于ρ因子的终止： 这类终止子结构上有2个特征 (2)发夹结构末端紧跟6个 连续的U，这发夹结构 阻碍了聚合酶的进一 步延伸，RNA链的合成 就终止，酶和mRNA就 从模板DNA上释放。 (1)DNA链的3′端附近有回文结构，富含 G-C碱基，随后紧跟的是A-T碱基，转 录而形成的RNA具有茎环的发夹形结构 （hairpin structure）。 B. 不依赖于Rho（?）的终止子 A. 依赖于Rho（?）的终止子 富含G-C 系列U 依赖ρ因子（rho factor）的终止： ρ因子是ρ基因编码的蛋白质，是一种酶，它具有ATPase的活性和解链酶的活性，在水解ATP的情况下，它沿着5′→3′方向转录物的3′端前进，直到遇到暂停在终止点位置的RNA聚合酶。随后ρ因子通过解链酶的活性解开转录泡（transcription bubble）上的RNA/DNA形成的杂交双螺旋，使RNA转录物得到释放，从而终止转录。 真核生物DNA错配修复机制与原核生物大致相同，但区分old strand和new strand的机制不同，详细的机理还不十分清楚。 (5). SOS修复（SOS repair）： SOS比喻细胞处于危险状态，是细胞DNA合成受到阻断或DNA受损伤时诱导产生的一种错误倾向修复。在DNA合成受阻或DNA受损伤时诱导出一种新的DNA聚合酶，这种新的DNA聚合酶能通过DNA损伤部位而进行复制，但复制的精确度很低。校对功能很差，因而容易出现复制的差错，从而导致高的突变率。 （?40个不同的位点被阻遏） RecA(辅蛋白酶) 未诱导的细胞 靶基因 lexA基因被LexA 蛋白质部分阻遏 recA基因被LexA 蛋白质部分阻遏 LexA(阻遏物) 靶基因表达 lexA靶基因表达 但产物被分解 recA大量表达 RecA促使分解LexA 诱导的细胞 单链DNA ATP