光合细菌混合培养条件的优化.doc

光合细菌混合培养条件的优化 摘 要: 对沼泽红假单胞菌( Rhodopseudomonas palustris，PL1) 和球形红假单胞菌( Rhodopseuelonmnas spheroids，PL2) 混合培养条件进行了优化研究。结果表明，混合培养的最适接种量为 6%，最适初始 pH 为 7. 5，低氧气浓度，180 r/min 振荡 10min / d。 关键词: 光合细菌 混合培养 培养条件优化 Optimization of Cultural Conditions for Mixed Photosynthetic Bacteria Abstract: Optimized cultural conditions of mixed photosynthetic bacteria ( Rhodopseudomonas palustris PL1，Rhodopseuelonmnas spheroids PL2) were evaluated. The results show that the optical cultural conditions mixed phothsynthetic bacteria include pH 7. 5，in- ocula 6% ，low oxygen concentration and vibration at 180 r / min for 10 min each day. Key words: Photosynthetic bacterium Mixed culture Optimized cultural conditions 近年来，对光合细菌( photosynthetic bacteria，PSB) 的应用研究获得了很大的进展，研究结果均表明，光 合细菌在种植、养殖、新能源开发利用、医药以及环 境治理方面具有十分广阔的前景 ［1］ 。然而，光合细 菌纯培养物在应用过程中的作用效率却大大低于实 验室，主要是由于其在环境中适应性较低 ［2］ ，因此， 许多研究者试图通过微生物的混合培养制备的菌 剂，以提高其环境适应性。如柄杆菌( Caulobacter) 与蓝细菌( Cyanobacteria) 混合培养，不仅可提高蓝 细菌生物量，而且促进色素合成和积累，提高乙炔还 原活力 ［2］ ; 丁酸梭菌( Clostridium butylicm) 、产气肠 杆菌( Enterobacter aerogenes) 和类红球菌( Rhobacter sphaerbdies) 共同培养，以甜土豆淀粉残留物为培养 基，可大大提高产氢量 ［3］ ; 而对于光合细菌的混合 培养方面则尚无系统研究。本文报道沼泽红假单胞 菌和球形红假单胞菌为混合培养条件优化研究，旨 在为光合细菌菌剂生产提供理论依据。 1 材料与方法 1. 1 菌株 光合细菌菌株: 沼泽红假单胞菌 PL1 ( Rhodop- seudomonas palustris PL1 ) 和球形红假单胞菌 PL2 ( Rhodopseuelonmnas spheroids PL2) ，保存于湖南省 植物保护研究所。 1. 2 培养基 光合细菌基础培养基: CH 3 COONa 3. 0 g，NaCl 1. 0 g，( NH 4 ) 2 SO 4 0. 3 g，MgSO 4 0. 2 g，KH 2 PO 4 0. 5 g，K 2 HPO 4 0. 3 g，CaCl 2 0. 05 g，酵母膏 0. 1 g，MnSO 4 0. 0025 g，FeSO 4 0. 005 g，蛋白胨 0. 01 g，谷氨酸 0. 0002 g，蒸馏水 1 L，pH 值 7. 5，121℃ 蒸汽灭菌 30 min。每升光合细菌基础培养基中加入 0. 15% ( W /2010 年第 6 期 张国民等: 光合细菌混合培养条件的优化 V) 琼脂即为固体光合细菌基础培养基。 1. 3 光合细菌混合接种液准备 将实验室保存的沼泽红假单胞菌和球形红假单 胞菌活化培养，分别稀释平板计数，然后，将沼泽红 假单胞菌和球形红假单胞菌按菌落数 1∶ 1 进行混 合，即为光合细菌混合接种液。 1. 4 培养条件优化 将光合细菌混合接种液接种于 450 mL 光合细 菌基础培养基的盐水瓶，光照培养; 进行接种量 ( 2% －10%) 、培养基初始 pH( 6 －9) 、氧气含量( 空 气含量 10% －50%) 及振荡培养条件( 180 r/min，5 － 20 min / d) 优化试验。 1. 5 混合光合细菌最佳培养条件下生长 混合光合细菌菌液，接入含450 mL 光合细菌基 础培养基的盐水瓶内，在上述优化的最佳培养条件 下培养，定时检测生长情况。 1. 6 混合光合细菌生长的