SEC工作站指南..doc

SEC操作指南 SEC概述 体积排阻色谱（SEC）是被用来测定大分子和聚合物类分子量分布的一门色谱科技。运行SEC（也可以叫做GPC）可以通过进入一个样品到由已知孔径的刚性聚合物凝胶构成的柱子里，小分子渗入到孔里并且比大分子保留时间长，在SEC里不包含柱吸附，是典型的分离色谱。因为分子的大小与它们的分子量有关，洗脱时间因此能被用来估计分子的分子量。大分子首先洗脱出来，小分子最后被洗脱。 在使用SEC分析天然组分时（通常是高分量聚合物），能碰到一个清楚的色谱图是比较少见的，在分离色谱里能出现基线分离的峰。因此在计算时，通常被设置成产生分子量分布（MWD）或平均分子量，而不去估计分子量的值。 因为对分子量的分布感兴趣，所以结果通常不仅只是包含平均分子量的值，同时也列出了这个样品的面积片断值，连同与它相对应的平均分子量值。这种类型的报告叫做“Slice Report”。 SEC校正 EZChrom Elite SEC单元提供了三种SEC校正方法：标准窄分布校正（Narrow Standard s Calibration），宽范围分布校正（Broad Range Calibration，有两种类型）和通用校正（Universal Calibration）。注意：为校正和分子量计算，时间单位被转换成秒。 标准窄分布校正（Narrow Standard s Calibration） 通过运行一个由已知分子量组分组成的标准品来建立校正曲线。这种校正的标准曲线是通过与保留时间相对应的分子量的对数来绘制的（Log M）。 宽范围分布校正（Broad Range Calibration） 将要使用的Hamielec方法：他为宽范围分布校正提供了两种可用的计算方法。 Broad Range 1是一个线性校正方法并且需要一支SEC柱来提供一条线性的校正曲线。它仅仅使用标准聚合物的平均MW值，但是却接近GPC校正曲线的线性（标准聚合物的Mn和Mw值必须是已知的并且能通过光散射和渗透压技术检测到）。这个方法需要一个与未知样品有相同结构的宽分子量分布（Broad-MWD）的标准品。它也应该尽可能地在任意组合的Mn和Mw里去使用两个不同的标准分子量与两个已知的MW值。 Broad Range 2是使用一个宽范围的标准品而没有线性校正的方法。 通用校正（Universal Calibration） 通用校正允许用一个窄范围的聚苯乙烯标准校正曲线来校正一个宽范围的聚合物。利用流体体积之间的关系（物质的分子量M与聚合物固有的粘度[?]和它的洗脱体积），窄分布校正曲线能被调整倒最精密地应用于被分析的样品。 聚合物固有的粘度[?]是通过直接测量聚合物溶液粘度的试验方法测定的。通过的聚合物分子量与Mark-Houwink等式有关。 [η]=Kma K和a是一个随聚合物种类、溶剂和温度改变的常数。表格里包含公共的K和a常数，使用于一般的聚合物种类。因此，使用公共的K和a值，或者是已测定的聚合物的粘度，一样都能检测出样品的分子量信息。 SEC的应用 SEC通常被用在高分子聚合物的质量控制上。分子量分布表示的是聚合物的物理性质。像这种性质包含有强度、柔韧性和粘性，等等其它。因为宽范围SEC峰的图形是可以改变的，在大多数情况下，只是检测平均分子量是不能充分说明聚合物的特征的，如两种聚合物可能有相同的平均分子量但分子量分布却非常不相同。因此它对计算不同范围的分子量非常重要，像检测一个有效的尖峰一样（在这里可以用重叠比较辅助）来得到一个正确的聚合物分子量信息。 各种不同的分子量数值被用来表示聚合物的不同特征，如下所示： Mn 数均分子量，被用来测定样品的粘性和柔韧性，是一种低分子量物质均衡性的函数。 Mw 重均分子量，表示为聚合物的强度，它给出了在样品里高分子量物质的比例。 Mz Z均分子量，被用来检测易脆性，并且指示样品里非常高的分子量物质的均衡性。 Mv粘均分子量，被用来说明样品的平均粘度与分子量之间的关系。 Mw/Mn 聚合度，是一个用来表示样品是如何单一的。一个小的数值表示的是最大的单一性，或者是窄分子量分布。较高的数值表示的是大的合成聚合物。 使用EZChrom Elite SEC软件 EZChrom Elite SEC软件是一个可选的附件包，可以在EZChrom Elite色谱数据系统里执行SEC计算。一旦SEC可用，它能够让用户去为已与系统连接的任意一个（或多个）仪器配置一个SEC仪器。当在另外一个仪器上执行SEC计算时，也可以在其它的仪器上执行正常的色谱分离计算。（注意SEC和色谱分离是明显不同的技术，因此它们不能在一个仪器里同时执行） 通常，执行一个SEC计算包含以下步骤： 运行SEC标准校正并且利用它去为SEC样品设置校正信息（方法/SE