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提取与分离技术在天然产物研究中的应用 摘 要：我国天然产物资源丰富，天然药物的研究有着很好的基础。随着提取分离的发展，尤其是超临界流体萃取、分子蒸馏技术、高速逆流色谱等技术的应用，加快了新药开发和中药现代化。为此,就一些新技术在天然产物成分提取与分离中的应用展开综述。 关键词：天然产物；提取；分离；超临界流体萃取；微波辅助萃取法；高速逆流色谱 1 引言 天然药物主要是指来自自然界中动物或植物的药物，非人工合成制备的。中药及其提取物在国外被视为天然药物，是我国医药宝库的重要组成部分。天然产物是药物开发的原料之一，分离和纯化其中的活性成分是中药研究的重要基础工作之一，其重要技术涉及天然产物活性成分快速、高效的分离和纯化，并进行结构鉴定。天然产物有效成分复杂，含量低，难于富集，用传统的分离方法不仅步骤繁琐，能源及材料消耗大，而且产率及纯度不高，尤其难以分离结构和性质相似的组分。近年来,随着一些新技术不断涌出,极大地提高了有效成分的收率和纯度以及中药制剂的有效性、稳定性。本文将就一些新技术在天然产物成分提取与分离中的应用展开综述。 2 新技术在提取工艺中的应用 2.1　超临界流体萃取 超临界流体萃取（supercritical fluid,SFE）技术是以超临界流体为溶剂，利用其高渗透性和高溶解能力来提取分离混合物的过程[1]。目前，临界萃取技术用于提取生物活性成分的报道不断出现，已涉及到几大类天然化合物（挥发油、苷类、多糖、萜类、生物碱、黄酮、单宁、甾体及有机酸等），引起了人们的极大兴趣。对于充分利用农作物资源、降低生产成本、提高产品产量具有重要的意义。 超临界流体相对接近液体的密度使它具有较高的溶解度,而相对接近气体的粘度又使得它具有较好的流动性能,扩散系数介于液体与气体之间,因此超临界流体对所有萃取的物质组织具有较好的渗透性。在临界点附近压力的很小变化都会使流体密度产生急剧变化,从而引起溶解度的改变,使其适合于对植物成分的提取。该法提取具有流程简单、步骤少、节能、传质速率快、穿透能力强、萃取效率高、操作温度低等特点,且无需使用大量有机溶剂,有显著安全性。该法尤其适合于对热及化学不稳定的化合物的提取,以及从混合物中提取低级性的组分[2]。 肖飞、李卫[3]用超临界CO2萃取大黄总蒽醌，得到萃取大黄蒽醌最佳条件为：萃取压力18MPa，萃取温度60℃，95％乙醇作夹带剂，用量为2倍药材量。王晓丹、史桂云[4]分别采用水提取法、传统乙醇提取法、微波提取法、超临界CO2萃取法提取柿叶总黄酮，结果表明超临界CO2萃取法提取总黄酮含量最高，且得到的萃取物纯净，色泽金黄，纯度高，无异味。 尽管超临界流体萃取技术所具有许多优点是其它方法无法比拟的，但该技术还存在着一下局限：如萃取极性大、分子量超过500的物质时，则需加夹带剂或在很高的压力下进行，这就需选择合适的夹带剂或增加高压设备。 2.2　微波辅助萃取法 微波萃取即微波辅助萃取(microwave-assisted extraction)是用微波能加热与样品相接触的溶剂,将所需化合物从样品基体中分离,进入溶剂中的一个过程。 微波是一种频率在300 MHz～300 CHz的电磁波,它具有波动性、高频性、热特性和非热特性4大基本特性。常用的微波频率2450MHz,微波加热是利用被加热物质的极性分子(如H2O,CH2Cl2等)在微波电磁场中快速转向及定向排列，从而产生撕裂和相互摩擦而发热。传统加热法的热传递公式为:热源→器皿→样品,因而能量传递效率受到了制约。微波加热是能量直接作用于被加热物质,其模式为:热源→样品→器皿。空气及容器对微波基本上不吸收和反射,从根本上保证了能量的快速传导和充分利用。 陈斌等[5]研究微波萃取葛根异总黄酮的工艺,用77%乙醇，固液比1/14,在低于60℃条件下,微波间歇处理3次，总黄酮浸出率达95%以上，与传统的热浸提相比，不仅产率高,而且速度快，节能。郭振库等[6]也用微波从葛根中提取黄酮类物质，研究表明微波对葛根素的分子结构并未造成破坏，并考察了处理时间、温度、提取压力等3个因素对提取的影响。 2.3分子印迹技术 分子印迹技术(Molecular imprinted technology，MIT)是一种通过制备对特定目标分子具有较高结合力和选择性的分子印迹聚合物(Molecular imprinted polymers，MIPs)来分离、纯化化合物的一种仿生技术。分子印迹聚合物具有许多优点如选择性强、化学性质稳定、对环境的耐受性好和制备简单等，因此己广泛应用于色谱分离、固相萃取、手性拆分、生物传感器、模拟酶催化等领域，文章主要针对其在天然药物研究中的应用做一概述。 单体与模板分子接触时会形成多重结合位点，当发生聚合时，这些位点会被固定下来，模板分子被洗