【高静】茶氨酸下调尼古丁对肺腺癌 H1299 细胞中 JAK2STAT3 mRNA 的表达研究【高静】茶氨酸下调尼古丁对肺腺癌 H1299 细胞中 JAK2STAT3 mRNA 的表达研究.doc

茶氨酸下调尼古丁对肺腺癌 H1299 细胞中 JAK2/STAT3 mRNA 的表达研究 高静1，史云峰2，禹利君1*，周清明3* 1. 湖南农业大学园艺园林学院茶学系，茶学教育部重点实验室，湖南 长沙 410128； 2. 湖南农业大学东方科技学院，湖南 长沙 410128； 3. 湖南农业大学农学院烟草系，湖南 长沙 410128 摘 要：为探索茶氨酸 对 Nicotine 诱导肺癌细胞增殖的抑制作用，本研究通过 MTT 实验筛选出茶氨酸、Nicotine 对肺腺癌细胞 H1299 的最佳作用浓度，利用实时荧光定量 PCR 技术检测茶氨酸、Nicotine 对 H1299 细胞 Bax、Bcl-2、Jak2 和 Stat3 基因 mRNA 相对表达量的变化。实验结果表明：茶氨酸 对 H1299 细胞的半数抑制浓度 IC50 值约为 250mM (24h)、100 mM (48h)；Nicotine 使用浓度在 1 μM 时对 H1299 细胞的促增殖作用明显；以 100 mM 的茶氨酸预处理 H1299 细胞 24 h 可显著下调 1 μM Nicotine 的促增殖作用（p0.05）。1 μM 的Nicotine 处理 H1299 细胞可明显降低 JAK2/STAT3 信号通路中 Bax 基因 mRNA 的表达，增加 Bcl-2、Jak2、Stat3 基因的 mRNA 表达； 100 mM Theanine 预处理H1299细胞可反向调控Nicotine 诱导所致 JAK2/STAT3 信号通路中Jak2、 Stat3基因表达量的变化，结果具有显著性差异（p0.05）,但对Bax、Bcl-2基因的表达未产生显著性影响。由此可知：茶氨酸 对 Nicotine 诱导的肺腺癌 H1299 细胞增殖起抑制作用，并且JAK2/STAT3 信号通路可能参与此作用的调控。 关键词：Theanine；Nicotine； H1299 细胞增殖；JAK2/STAT3 基因表达 Research on Theanine antagonizing nicotine induce H1299 cancer cell JAK2/STAT3 mRNA expression levels GAO Jin1, SHI Yun-feng2, YU Li-jun1*, ZHOU Qing-ming3* 1. Key Lab of Tea Science of Ministry of Education, Tea Science Department, College of Horticulture and Landscape, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 2. Orient Science Technology of Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 3. Tobacco Science Department, College of Agriculture, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China Abstract: In order to explore the inhibitory effect of Theanine on nicotine which induced lung cancer cells proliferation, this study selected the optimal concentrations of Theanine and nicotine on lung adenocarcinoma cancer cell H1299 by MTT experiment, and detected mRNA relative expression levels of Bax, Bcl-2, Jak2 and Stat3 genes in H1299 cells using qRT-PCR technique. Experiment results have been showed that the IC50 of Theanine on H1299 lung adenocarcinoma cells is about 100 mM (treated 48h) and 250 mM (treated 24h), nicotine obviously promotes the proliferation of H1299 lung adenocarcinoma cell at 1 μM concentra