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(2)分离培养 即采集即培养,常用含有两种以上抗生素(万古霉素、粘菌素、磺胺类等)的选择培养基上培养(如ML、TM) 5-10%CO2 培养基先预温。 氧化酶试验: (+) 触酶: (+)(多数奈瑟菌为阴性) 葡萄糖(+),麦芽糖(-) PCR:灵敏,特异,标本不受限制(不需活菌) (3)鉴定 1.名词解释: 血浆凝固酶、SPA、抗链“o”试验、Optochin试验。 2.根据色素和生化反应将葡萄球菌分成哪几种? 3.金黄色葡萄球菌的鉴定依据有哪些? 4.根据链球菌在血平板上的溶血现象,将其分成哪些类型?甲链和乙链有何区别? 5. 简述链球菌的检验程序和检验方法。 6. 脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌有哪些异同点? 7.采集脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌的标本进行细菌检验应该注意哪些问题?为什么? 复习思考题 中等大,突起, 有色素,S型菌落。 葡萄球菌菌落形态 (普通琼脂平板) 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 金黄色葡萄球菌有透明溶血环。 表皮葡萄球菌无溶血环。 葡萄球菌A蛋白(SPA)的意义: (1)降低抗体的调理作用,抗吞噬 (2)协同凝集试验:辅助诊断疾病。 血浆凝固酶试验 [原理]致病性葡萄球菌能产生2种血浆凝固酶: 一种为结合型凝固酶(凝聚因子):细菌表面的纤维蛋白原受体与血浆中的纤维蛋白原结合,导致细菌凝集。 另一种为游离型凝固酶,可被人或兔血浆中的协同因子激活,成为凝血酶样物质,使纤维蛋白原变为纤维蛋白,从而使血浆凝固。 [检测方法]结合型凝固酶:玻片法 游离型凝固酶:试管法 耐热核酸酶试验 液体培养物 煮沸15min 37℃3h 甲苯胺蓝核酸琼脂 肠毒素测定 病人呕吐物、粪便、剩余食物 高盐肉汤 37℃24h 分离培养 肉汤煮沸30min, 离心,取上清夜 幼 猫 观察症状(4h出现) SPA的检测 致病性葡萄球菌 (SPA) 兔抗羊红细胞Ab (IgGFc) SRBC 致敏羊红细胞 凝固酶阳性葡萄球菌的鉴别 结合型 游离型 耐热核酸 VP 鸟氨酸脱 血浆凝固酶 血浆凝固酶 酶试验 试验 羧酶试验 金黄色 + + + + — 葡萄球菌 中间型 — + + — — 葡萄球菌 (罕见) 希氏 + — + + + 葡萄球菌 凝固酶阴性葡萄球菌的鉴别 见P167表17-1 表3 几种常见葡萄球菌的鉴别 细菌 菌落颜色 溶血 触酶 凝固酶 甘露醇 新生霉素 金黄色 金黄色 β + + + S 葡萄球菌 表皮葡萄 白色 γ + - - S 球菌 溶血葡萄 白色 β + - - S/R 球菌 腐生葡萄 柠檬黄 γ + - - R 球菌 Staphylococcus aures?(-) 表皮葡萄球菌(S) 腐生葡萄球菌(R) 阴性结果 (S) 新生霉素耐药试验 链球菌菌落(血平板): 细小,灰白色,圆形,突起,光滑,湿润,边缘整齐,不同菌种菌落周围有不同溶血环。 甲型溶血性链球菌 (草绿色链球菌) 丙型链球菌 乙型溶血性 链球菌 猩红热 蜂窝织炎 Neisseria gonorrhoeae 烫伤样皮肤综合征 多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人,开始有红斑,1~2天有皮起皱,继而形成水疱,至表皮脱落。由表皮剥脱毒素引起。 CAMP试验 (B群无乳链球菌+) - +:溶血环呈箭头状 金黄色葡萄球菌 杆菌肽试验 (A群链球菌+) 第三节 肠球菌属 是肠道中的正常菌群 导致医院内感染:如尿路感染、腹部和 盆腔感染、败血症、脑膜炎。 一、生物学特性 (一)形态染色 G+球菌,单个、成双或短链状排列。无荚膜、芽胞,部分菌株有鞭毛。 营养要求较高。能在高盐(6.5%NaCl)、高碱(PH9.6)
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