鹅细小病毒的研究进展.docx

鹅细小病毒的研究进展朱沿秋，兽医1班，学号：动物医学院，四川农业大学）摘要：小鹅瘟是由鹅细小病毒引起的一种急性、亚急性烈性传染病, 是目前危害养鹅业的重要传染病之一。近年来关于鹅细小病毒的研究有了许多新的发展和新的观点, 本文从鹅细小病毒的病原、致病机理、检测方法及防治等方面的研究进行阐述，以期为鹅细小病毒及小鹅瘟的防控提供参考。关键词：小鹅瘟；鹅细小病毒；分子生物学；致病机理小鹅瘟（Gosling Plague，GP）是由鹅细小病毒（goose parvovirus，GPV）所引起的雏鹅的一种急性或亚急性的败血性传染病，是目前危害水禽业健康发展的最严重的传染病之一。1956 年，小鹅瘟病毒首次由中国学者方定一在江苏扬州市发现并分离，是一类无囊膜的DNA 病毒[1]。1974 年，国际禽病学会( WPSA) 将其命名为Derzsys 氏病[2]。近年来，1月龄以上鹅群发病的病例有所增加。病鹅、带病鹅群及隐性感染的成鹅是该病的主要传染源。小鹅瘟在我国各地均有流行，病鹅以精神委顿、食欲废绝、严重下痢和渗出性肠炎为主要特征[3-4]，有时出现神经症状，可经消化道和呼吸道传染，并可经卵垂直传播。该病在许多国家出现报道，给全球养鹅业造成了严重危害[5-9]。1病原鹅细小病毒是细小病毒科（Parvoviridate）、细小病毒属（ParvovirusGenus）的成员、无囊膜的单链DNA病毒，病毒粒径约20nm，是目前已知的动物病毒中较小、较简单的病毒之一[10]，不能凝集禽类、哺乳动物和人类的红细胞。其对外环境的抵抗力较强，56℃能耐受3小时，pH=3时仍稳定，对一些消毒药有较强抵抗力[11]。抗原分析表明，国内外所有GPV 分离株属于同一个血清型[12]。GPV 可在鹅胚、鸭胚及其细胞上适应和培养。GPV 实验室感染雏鹅或雏番鸭后，病毒在体内呈广泛分布，尤其在肝、脾、哈德斯腺、胸腺和法氏囊中病毒含量较高[13,14]。因此，病鹅的心血、肝脏、脾脏、脑及肠管和肠内容物均可用于病毒分离。病料用生理盐水或PBS 研磨制成1∶5～1∶10 悬液，3 000r/min离心10min，每1mL 上清加入青霉素、链霉素各1000IU，37℃孵育30min，接种12～14 日龄鹅胚绒毛尿囊膜（CAM）或尿囊腔，接种后3～7 天，鹅胚死亡。死亡鹅胚病变表现为：CAM 增厚并有灰白色坏死点，鹅胚全身充血，翅尖、趾、颈部和喙旁有严重的出血点。肝脏充血及边缘出血，心肌、后脑出血，头部、颈部及两肋皮下均有水肿[15]。2 鹅细小病毒的致病机理目前关于GPV 的致病机理还不是很清楚, 而且研究报道也很少。宿主细胞类别、细胞受体的类型及跨膜侵染机制均未见报道, 近年来其致病机理越来越受到人们的重视, 尤其GPV 在的患病雏鹅体内的定植规律。杨静红[16]采用PCR 检测人工感染雏鹅后24 h 内在心脏、肝脏、肺脏、肾脏、十二指肠、空肠、脾、法氏囊、胸腺等多个组织, 第3 天在盲肠, 第4 天在粪便和大脑, 第5 天在食道中都检测到了GPV 。而从第6 天开始GPV 在不同组织中逐渐消失, 首先是肝脏, 然后是盲肠和血液, 第21 天时只有空肠中GPV 呈阳性。由此可以看出GPV 具有广泛的嗜组织细胞特性及较强的复制能力;感染GPV 5 d 后病毒侵染机体达到最大值, 并且肠道上皮细胞可能是GPV 最终定植的部位。周春宇等[17]通过建立间接免疫组织化学法检测了GPV 在雏鹅体内的分布规律:经皮下注射、口服和滴鼻感染8 h ～ 24 d 内能从多种组织器官中检测到GPV 的分布。皮下注射感染后96 h 病毒在机体内各组织的分布最为广泛, 口服、滴鼻组感染后144 h 病毒在机体内各组织的分布最为广泛, 这与GPV 经皮下感染后, 病毒能在雏鹅体内的分布速度较经滴鼻和口服感染组的分布速度要快的报道一致(黄诚等, 2004)。但未能从食道中检出病毒抗原, 由此可以看出间接免疫组织化学方法不如PCR检测方法灵敏。毕建敏等 [18]用建立的荧光定量PCR(FQ-PCR)检测鹅细小病毒的方法, 检测3日龄雏鹅人工感染GPV SD2005 株后各器官不同时间段的病毒含量,表明在攻毒8 h 后才能从消化系统及肝脏、心脏和血液中检测到病毒DNA ;病毒DNA 含量在48 h 后达到最高峰, 并一直持续到168 h , 各待检脏器中病毒DN A 含量开始降低, 但720 h 后仍能从粪便、肝脏和脾脏中检测到少量的病毒DNA , 为阐明GPV的致病机理及防控提供了重要的试验数据和理论依据。3鹅细小病毒病的检测方法和防治措施3.1检测方法在生产中，正确诊断是有效防控该病的关键所在。过去常常以病毒的分离鉴定和剖检的病理变化进行确诊，需要较长时间，操作也较复杂。另外，检测