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荧光共振能量转移课件.ppt

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荧光共振能量转移(FRET) 黎景景 两个荧光发色基团在足够靠近时,当供体分子吸收一定频率的光子后被激发到更高的电子能态,在该电子回到基态前,通过偶极子相互作用,实现了能量向邻近的受体分子转移(即发生能量共振转移) FRET是一种非辐射能量跃迁,通过分子间的电偶极相互作用,将供体激发态能量转移到受体激发态的过程,使供体荧光强度降低,而受体可以发射更强于本身的特征荧光(敏化荧光),也可以不发荧光(荧光猝灭),同时也伴随着荧光寿命的相应缩短或延长。 原理 FRET系统 分子信标 在较低温度下,分子信标与靶标结合呈 S1 状态,发出荧光。 随着温度升高,分子信标与靶标分离,分子信标重新恢复为发卡式结构即 S2 状态,从而荧光强度减弱。 温度持续增高,将导致分子信标熔链即 S3 状态,荧光基团与淬灭基团分离,导致荧光恢复。

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