大豆品种抗病性鉴定技术规范..doc

1主题内容和适用范围 本规范规定了大豆品种胞囊线虫病抗性鉴定技术和抗病性评价标准。 本规范适用于安徽省主要农作物品种审定中大豆胞囊线虫病抗性鉴定和抗性评价。 本规范同时适用于安徽省大豆品种区域试验、生产试验和自然诱发鉴定中大豆胞囊线虫病病情调查和抗性评价。 3术语和定义 3.1 大豆胞囊线虫病 Soybean Cyst Namatode 由大豆异皮线虫(Heterodera glycines Ichinche)所引起的以叶部黄化和植株矮化症状为主的大豆线虫病害。 3.2 对照品种 本规范中特指为检验试验的可靠性，在品种鉴定时附加的在特定生态区表现为已知抗病程度的抗病品种（Peking）或感病品种（Lee）。 3.3 胞囊指数 通过对植株个体根部着生胞囊数值的综合计算所获得的群体发病程度的数值化描述形式。 4、病原物 4.1病原物来源 在安徽大豆产区的不同生态区采集大豆胞囊线虫，按生理小种（群）建立菌种库。 4.2 接种体 接种体一般为单个生理小种，或淮北、江淮丘陵、沿江等生态区内不同生理小种的混合菌种，一般根据委托单位要求从菌种库中制备。 没有特定要求的情况下，接种体为菌种库中必威体育精装版的病原物。 4.3．供试大豆胞囊线虫繁殖（用有胞囊的土壤繁殖） 采集的土壤胞囊线虫密度在30个胞囊/100克土壤或60个卵/克土壤时可以直接进行抗性鉴定。如果线虫量低于以上标准，要种植多个感病品种进行1代的扩繁。 4.4 大豆胞囊线虫卵的分离和卵悬浮液配备 通过漂浮过筛法进行胞囊分离，获得的胞囊采用组织细胞匀浆器破碎胞囊后过200目网筛后在500目网筛下收集卵，并配成200粒卵/ml的卵悬浮液。 5 鉴定圃 5.1 选择在有较好生态代表性的试验基地建立胞囊分布均匀的田间病圃，具体条件符合4.3规定。 5.2 自然诱发鉴定试验圃应当选择在淮北、江淮丘陵、沿江等生态区内大豆生产集中产区。 5.3 鉴定圃设计、种植和管理因鉴定方法不同而异，具体见6.1，6.2。6 鉴定 6.1田间病圃鉴定法 6.1.1．种植方法 选择符合要求的病圃，6月上中旬播种，每份材料种1行，行长2米，留苗15-20株，2次重复。鉴定品种中加入抗病或感病的对照品种。 6.1.2．病情调查 播种出苗后正常田间管理，播后第26-29天检测抗性对照品种根部的大豆胞囊线虫的发育情况，当大豆胞囊线虫白色的雌虫突出表皮时，即可进行挖查，调查记录每株大豆根上的白色胞囊的数量。挖查过晚或过早，调查结果都不准确。 每个品种每次重复调查15株，共调查30株。 病情调查记载表格式见附录A，附录A-1.A-2由鉴定单位自行选择一种。 6.2人工接种（盆栽）鉴定法 6.2.1 供试土壤 采用无线虫胞囊的土壤，按2：1的比例混入细纱装入花盆或薄塑料杯备用。 6.2.2．接种方法 鉴定在温室中进行，将装入花盆或薄塑料杯备用的土壤浇透水后，每个用铅笔或木棍在花盆或薄塑料杯的对称处扎两个小孔，将供试鉴别寄主大豆品种催芽后待根长出1cm左右时挑选均匀的豆苗，播入小孔中，每个孔中浇灌（含200粒卵/ml ）5ml卵悬浮液后覆土封盖后培养。每品种播种20株，25℃下正常管理。每次加10株感病对照品种。 如果在塑料杯中鉴定，每杯种1株，接种（含200粒卵/ml ）5ml卵悬浮液。 6.2.3 病情调查 播种25天后检测感病品种根部的大豆胞囊线虫的发育情况，当大豆胞囊线虫白色的雌虫突出表皮时，即可进行扣盆调查记录每株大豆根上的白色胞囊的数量。 每个品种调查20株。 病情调查记载表格式见附录A，附录A-1.A-2由鉴定单位自行选择一种。 6.2.4 鉴定调查记载表要有鉴定人员和复核人员签字。在开展鉴定调查时，鉴定人员与复核人员一同进行，鉴定人员对鉴定植株病情级别进行判断，经复核人员确认后记载。 6.3抗性分离现象记载 若一个鉴定群体中出现明显的抗、感类型，应在调查表中注明“抗性分离”。用/表示。 6.4 一般只选择6.1或6.2中一种方法进行鉴定。如果选用2种方法鉴定，鉴定单位要对鉴定结果进行综合评定。 7 抗性评价 7 1 抗性类别划分标准 7.1.1 田间病圃鉴定法抗性类别划分标准（表1） 7.1.2 盆栽鉴定法抗性类别划分标准（表2-南京农业大学用标准） 胞囊指数保留1位小数。 表1 田间病圃鉴定法抗性类别划分标准 抗性级别 根系平均胞囊数量 抗性类别 缩写 类别 1 0 I 免疫 3 0.1-3.0 R 抗 5 3.1-10.0 MR 中抗 7 10.1-30.0 S 感 9 ＞30 HS 高感 抗性类别 类别 3 0.1-15 R 抗 5 15.1-40 MR 中抗 7 40.1-70 S 感 高感 7.4.2 达到免疫-抗或感-高感类别的鉴定品种，当两年抗性类别不一致时，以记载的最高