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酶比活力的测定 ? 在最适条件下,单位重量的酶在单位时间内催化作用后，得到的产物形成量，或底物消耗量. ? 实验材料和方法 ? 实验材料和方法 ? 酶比活力 * * ?酶的比活力的概念 ?产物形成量，或底物消耗量/mg(酶).min(催化时间) ? 实验原理 ? 枯草杆菌蛋白酶 ? 枯草杆菌蛋白酶水解酪蛋白为酪氨酸 ? 酪氨酸具有还原性 ? 酪氨酸可用Folin试剂测定其含量 ? 酪氨酸标准曲线的测定（P63） ? 酶活力测定 ? 酶活力测定(按顺序操作) 试管号 1 (反应管) 2 (反应对照管) 3 30 ℃预热 5min的酶 0.5mL 0.5mL ---- 30 ℃预热 5min的0.5%酪蛋白 2mL ---- ---- 30 ℃反应 5min ----- ----- 10% 三氯乙酸 3mL 3mL ----- 30 ℃预热 5min的0.5%酪蛋白 ------ 2mL ----- ----- 30 ℃反应 5min ----- 过滤取1mL 过滤取1mL 水1mL 碳酸钠 5mL 5mL 5mL 酚试剂 1 mL 1 mL 1 mL ? 酶的量(P63) ? 取1g酶,定容至100mL ? 过滤, 取滤液5mL,稀释50倍 ? 产物形成量(P63) ? 根据酶促反应所产生的酪氨酸还原Folin试剂的量(A680nm) 注意酶促反应所产生的酪氨酸的部分用于还原Folin试剂 ? 根据标准曲线求出酪氨酸形成量
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