仪器分析作业格式仪器分析作业格式.doc

试卷密号： 试卷密号： 考试科目： 吉 林 大 学 研 究 生 课 程 考 试 试 卷 学位级别： 　 硕士 　 考试科目： 　　仪器分析　　 学科、专业： 预防兽医学 学院、中心： 　 姓 名： 学 号： 考试时间： 题号 分 数 阅 卷 人 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 总分 注意：此半页各项考生不得填写 注 意 事 项 1.以上各项除试卷密号之外必须填写清楚 2.答题必须写清题号 3.字迹要清楚、保持卷面清洁 4.试题随试卷交回 5.草稿纸另发，考试结束后统一收回 6.阅卷时由研究生处按虚线将右半页裁下另编试卷密号 蛋白的功能研究 实验设计： １虫的体外培养； ２.Mucin-like基因的克隆及表达； ３.抗体的制备及免疫荧光； ４.体外阻断侵入实验。 实验流程： 分离纯化隐孢子虫→提取mRNA→反转录出cDNA； 计RNA引物→转录DNA→PCR扩增→测序→表达蛋白→纯化蛋白→免疫动物得到多抗→荧光标记→用虫子入侵动物细胞并设阴性对照→检测免疫动物细胞内有无虫体。 实验中用到仪器有：4℃离心机、CO2细胞培养箱、PCR仪、水浴锅、蛋白电泳仪、凝胶成像仪、摇床、超声破碎仪、荧光显微镜等。 Ⅰ 4℃离心机操作步骤： 1.使用前要确认离心腔内没有异物，转头及其密封圈完好无损；使用前请确定转头已固定于离心机转轴之上（使用随机工具）； 2.头盖须旋紧到位(无缝隙)。必要时在螺纹上涂抹润滑油，在密封圈上涂抹硅脂（随机配备）； 3.如果样品对温度要求严格，就需对机器及转头进行预冷或预热。按正常工作安装好转头，按程序选择上键使显示行，机器自动按所安装的转头及设置的温度选定转速进行预冷/热，大约30分钟左右到所需温度； 4.关闭离心腔门，按实验要求设置参数后按开始键开始运转； 5.在多次使用中，在机器通电的情况下保持离心腔门关闭以保持腔内温度并防止过多冷凝水的形成；在使用结束后，在机器断电情况下打开离心腔门以利于腔内腐蚀性气体及冷凝水的散发；如长时间不使用，在确认离心腔内干燥清洁的情况下，机器断电，关闭离心腔门。 注意事项： 1.严格 2.经常清理机器前部进气口，以保证机器工作正常（尤其是在炎热的夏天）。 Ⅱ CO2细胞培养箱操作步骤： １.向水池中注入蒸馏水３L，关门； ２.将超温控制器旋钮调至39℃； ３.接通电源开机； ４.仪器自动常规检测40S，同时按下[ ▲ ][ ▼ ]，“ CO2％”窗口显示[0.0]，AUTO-START灯亮，放开两键； 5.仪器将启两键然后按[i]确认，此时“﹪CO2 ”显示[.0]； 6. 将气源出口压力调至1bar； 7. 一手按“﹪CO2 ”另一手输入CO2设置值； 8. 仪器自动通气，此时仪器方可用于培养； 9. 仪器使用结束后，必须按照步骤10将设置CO2值为[.0﹪]再关闭电源。打开玻璃门擦干内腔体。 注意事项： 1.蜂明器发出声音要及时按[i]检测故障代码。 2.CO2培养箱之CO2浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。 3.CO2钢瓶之CO2压力。 Ⅲ 凝胶成像仪操作步骤： 开启电脑至windows处于正常工作状态； 双击桌面上相关图标进入软件； 拍摄 打开显像仪的铁门； 把凝胶置于台上,并将铁门关上； 打开紫外灯电源； 经电脑控制拍摄,保存图像； 拍摄完毕,关闭电源,取出凝胶； 工作完毕关闭软件窗口。 注意事项: 操作过程中,除“把凝胶置于台上外”,一律不许带手套,以防EB污染。 此 页 考 生 不 得 写 字