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二:遗传物质确定的过程 (一)、实验 一:肺炎双球菌体内转化实验—格里菲思 2、肺炎双球菌体内转化实验过程 实验二:艾弗里及同事的肺炎双球菌体外转化实验 (3)怎样标记噬菌体 第一步:先标记大肠杆菌 第二步:再标记噬菌体 四、生物的遗传物质 四、生物的遗传物质 总结论 DNA是主要的遗传物质 只有RNA病毒是以RNA为遗传物质 用32p标记噬菌体后侵染细菌 实验材料: 噬菌体、大肠杆菌 实验步骤: 1.标记大肠杆菌: 2.标记噬菌体: 3. 标记的噬菌体分别侵染未标记的大肠杆菌: 4. 搅拌离心培养液: 上清液(培养液) 沉淀物(大肠杆菌含子代噬菌体) 5.观察放射性 * 第3章:基因的本质 一、引 入 (1)、于生活中通过观察发现生物学问题 思考:要作为遗传物质需要些什么条件? 4、能指导蛋白质的合成 ,从而 控制新陈代谢过程和性状 1、能贮存大量的遗传信息 3、分子结构相对稳定,特定情况下能产生 可遗传的变异 2、能自我复制,使前后代保持 一定的连续性 一、遗传物质具备的条件 二:遗传物质确定的过程 共有三套经典的实验: 1、肺炎双球菌转化实验(①格里菲斯体内转化实验②艾弗里的体外转化实验) 2、赫尔希、蔡斯的噬菌体侵染细菌实验 3、烟草花叶病毒侵染烟草的实验。 粗糙(Rough) 无多糖荚膜 无毒性 光滑(Smooth) 有多糖荚膜 有毒性 多糖荚膜 S型细菌 R型细菌 S R 肺炎双球菌 1、材料:小鼠 、肺炎双球菌 人:肺炎 鼠:败血症 导致 活R + 有毒S型死细菌 小鼠死亡 有毒S型死细菌 ???? 小鼠正常 有毒S型活细菌????? 小鼠死亡 无毒R型活细菌?????????小鼠正常 第一组 第三组 Text in here 第二组 第四组 R 活R + 有毒S型死细菌 小鼠死亡 第四组 + S 活R 死S 小鼠死亡 S 活S S中的转化因子 3、结论:杀死的S型菌中含有能使活R 型菌转化成S型活菌的转化因子 1、实验设计思路:把S型菌的成分分离开,分别与R型菌共同培养,分别验证 2、实验材料: S型肺炎双球菌 4、实验结论 多 糖 蛋白质 DNA “转化因子”是DNA,DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。 +R 菌 +R 菌 +R 型 R 型 R 型 S 型+R型(多数) 3、肺炎双球菌体外转化实验过程 S型活细菌 DNA的纯度越高,转化就越有效。 目 录 DNA+DNA酶+R菌 R型 新问题 DNA纯度不够,是否是0.02%的蛋白质在起作用呢,如何获取单独的DNA或者蛋白质进行实验? 实验三: 噬菌体侵染细菌实验——赫尔希、蔡斯 1、实验材料:T2噬菌体、细菌 噬菌体的结构模式图 (1)寄生生活 (2)寄生于细菌中 (3)只有一种核酸—DNA 本实验最能说明DNA是遗传物质的2个步骤是: 2和5 噬菌体侵染细菌的动态过程 2、实验设计方法及思路 (1)方法:同位素标记法 蛋白质的组成元素: DNA 的组成元素: C、H、O、N、S C、H、O、N、P (标记 35S ) (标记 32P) (2)思路:用35S 和32P分别标记噬菌体的蛋白质和DNA,然后侵染细菌,其目的是:把DNA和蛋白质分开,直接、单独的观察各自作用 1.35S标记的组,主要在上清液中检测到放射性,32P标记的组,却主要在沉淀中检测到放射性,说明了什么? 3. 为何35S标记的组沉淀中有少量放射性,而32P标记的组上清夜中也有少量放射性? 4.细菌裂解后,释放出的大量子代T2噬菌体中,可以测到32P标记的DNA,但却不能测到35S标记的蛋白质,这又说明了什么? 3、噬菌体侵染细菌的实验过程 4、实验结论:DNA是真正的遗传物质。 思考:此实验能否直接说明蛋白质不是遗传物质? DNA 是遗传物质。 1928年 格里菲思 ——体内转化实验 1944年 艾弗里——体外转化实验 1952年 赫尔希、蔡斯——噬菌体侵染细菌实验 有些病毒(如烟草花叶病毒),它们不含有DNA, 只含有RNA和蛋白质。 在这种情况下,RNA和蛋白质哪个起着遗传物质的作用? 【实验三、烟草花叶病毒感染实验】 实验四:烟草花叶病毒侵染烟草实验 结论 RNA是烟草花叶病毒的遗传物质 生物的遗传物质除了DNA外,还有RNA 。 原核生物的遗传物质为DNA 真核生物的遗传物质为DNA 细胞生物的遗传物质为DNA 噬菌体的遗传物质为DNA HIV、SARS等病毒的遗传物质为RNA 病毒的遗传物质为DNA或RNA 结论:因为绝大多数生
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