多糖的提取工艺多糖的提取工艺.doc

多糖的提取工艺　摘要：目的利用响应表面实验设计优化茯苓皮中茯苓多糖的提取方法和工艺条件。方法利用单因素实验优化茯苓皮中茯苓多糖的提取方法，在单因素实验的基础上利用响应表面实验设计考察碱法提取过程中碱浓度、提取时间、料液比对多糖提取量的影响。结果茯苓皮中多糖的最佳提取方法为碱法提取,其提取条件可用回归方程 Y=7.89＋15.249X1－35.4X12＋8.375X2－0.885 X22＋7.333X1X2 描述。结论 最佳提取方法为碱法，最佳提取工艺条件为：NaOH浓度0.84 mol/L,时间8.89 h,料液比1150。关键词：茯苓皮；? 茯苓多糖；? 提取；? 响应表面实验设计　茯苓皮为多孔菌科真菌茯苓Ponia cocos (Schw) Wolf菌核的外皮，茯苓皮在临床上用量很少，绝大部分被当作废料弃去。茯苓皮中含有一定量的茯苓多糖，茯苓多糖具有保肝降谷丙转氨酶、增强免疫、镇静、降血糖及抗肿瘤等作用，被广泛应用于中成药、保健食品、美容药膳,具有较好的开发前景［1~5］。潘琦、段启等［4，5］曾分别进行过水提、碱提单因素实验研究和有机溶剂提取工艺的研究，本研究在水提、碱提和超声波提取单因素实验研究的基础上利用响应表面实验设计优化最佳提取工艺条件，为茯苓皮的开发利用奠定基础。 1? 器材　1.1? 主要仪器UV752型可见紫外分光光度计；JJ系列电子天平；赛多利斯BS系列电子天平；HHS型电热恒温水浴锅；HS10260D超声波提取器；XYJ802离心沉淀机。 　　1.2? 茯苓皮云南思茅地区加工茯苓白块所切削的茯苓皮干品，粉碎备用。 　　1.3? 主要试剂浓硫酸、氢氧化钠、苯酚、无水葡萄糖均为国产分析纯。苯酚溶液： 称取苯酚6 g，加水至100 ml即得。葡萄糖标准液：精密称取105下干燥恒重的葡萄糖100.3 mg加蒸馏水溶解并定容至100 ml。 　　2? 方法与结果 　　2.1? 茯苓多糖测定采用硫酸苯酚法按文献［6］中的方法测定。 　　2.2? 水提法称取一定量茯苓皮,在料液比一定的条件下，考察提取次数、提取时间和提取温度与茯苓多糖提取量的关系。 　　2.3? 超声波提取法称取一定量茯苓皮, 在料液比一定的条件下,考察超声提取时间和提取温度与多糖提取量的关系。 　　2.4? 碱法提取多糖称取一定量茯苓皮,在料液比一定的条件下，室温提取30 min，考察碱浓度与多糖提取量的关系。 　　2.5? 水提法 　　2.5.1? 提取次数的考察称取一定量茯苓皮，在料液比140，提取温度95，提取30 min/次的条件下，考察提取次数与茯苓多糖提取量的关系。（结果见图1）由图1可知，茯苓皮提取的多糖量随累积提取次数的增加而增加，但从第2次开始提取的多糖量并迅速减小，综合考虑提取过程中的能耗、水耗等因素，宜采用一次提取。 　　2.5.2? 提取时间的考察称取一定量茯苓皮，在料液比140，提取温度95， 提取一次的条件下,考察不同提取时间与多糖提取量的关系。（结果见图2）由图2可知, 在10～20 min之间，茯苓皮多糖的提取量随提取时间的增加快速增加,20 min之后则变化缓和,故提取时间以20～30 min为宜。 [next] 　　2.5.3? 提取温度的考察 称取一定量茯苓皮，在料液比140，提取时间30 min，浸提一次的条件下,考察提取温度与多糖提取量的关系。（结果图3）由图3可知,茯苓皮中多糖提取量在20～40之间随提取温度的增加而增加，温度高于40后则呈下降趋势，60～80之间变化不大,在沸腾状况(95)下原料处于不断运动状态，其多糖提取量有所上升，提示搅拌使茯苓皮不断运动有利于多糖的提取，故宜选用40搅拌提取。 　　图1? 茯苓皮水提取次数与多糖提取量的关系（略） 　　图2? 茯苓皮水提取时间与多糖提取量的关系（略） 　　图3? 茯苓皮水提取温度与多糖提取量的关系（略） 　　2.6?? 超声波提取法 　　2.6.1? 超声提取时间的考察称取一定量茯苓皮, 在料液比140，超声频率40kHz，超声提取一次的条件下,考察超声提取时间与多糖提取量的关系。（结果见图4）由图4可知,茯苓皮多糖提取量随超声时间的增加而增大,当提取时间达到30 min后,提取时间对提取量的影响减小,曲线变得较平缓。故一次超声提取的时间以30 min为宜。 　　图4? 茯苓皮超声提取时间与多糖提取量的关系（略） 　　2.6.2? 超声提取次数的考察称取一定量茯苓皮, 在料液比140，超声频率40kHz，超声提取30 min/次的条件下,考察超声提取次数与多糖提取量的关系。结果见图5。 　　2.7? 碱法提取称取一定量茯苓皮，在料液比1200,室温浸提30 min条件下,考察碱浓度与多糖提取量的关