张延浩毕业论文.doc

石河子大学动物科技学院本科毕业论文 垦区猪肺炎支原体P97基因的检测 院 （系）： 动物科技学院 专 业：动物医学 学 号： 2010513200 姓 名： 指导教师： 李劼（副教授） 新疆 石河子 2014.6 摘要 为了解石河子垦区猪肺炎支原体P97基因的遗传变异情况，采集石河子部分规模化猪场的猪支原体肺炎疑似病料，采用PCR方法对疑似病料进行了黏附基因P97的检测，将PCR产物测序并与Genbank已登录的标准菌株序列进行同源性分析。结果显示：75份病变肺脏中，阳性病料43份，阳性率为57.33%（43/75），P97基因序列与参考菌株的同源性为98.4%～99.2%。检测结果表明石河子垦区猪支原体肺炎的感染情况比较严重，猪肺炎支原体流行株与国际标准菌株有很高的同源性。 关键词：猪肺炎支原体；P97基因；PCR检测 Abstract The current situation of prevalence of Mycoplasma hyopneumoniae (Mhp) and its corresponding genetic variations of P97 gene in some large-scaled pig farms in the reclamation area of Shihezi was measured. Suspicious Mhp samples were collected and detected that PCR (polymerase chain reaction) method was utilized to detect the P97 which is a adhesin gene of the positive Mhp samples and the obtained gene sequences of clinic samples were compared with the standard strains sequence in the Genbank via homology analysis. The results show that the ratio of positive samples in all the detected suspicious Mhp lung samples is 57.33% (43/75) and the genetic homology of the detected P97 gene sequences to the standard strains sequence is 98.4%~99.2%. Our detection results indicate that the prevalence of Mhp in the reclamation area of Shihezi and its surrounding areas is severe and local epidemic Mhp strains have high homology with international standards. Key words:Mycoplasma hyopneumoniae;P97 gene ;PCR detection 目 录 1材料与方法 1 1.1材料 1 1.1.1样品来源 1 1.1.2主要试剂 1 1.1.3主要仪器 1 1.2方法 2 1.2.1病料组织DNA的提取 2 1.2.2阳性对照菌株DNA的提取 2 1.2.3引物设计 2 1.2.3 PCR扩增体系 3 1.2.4 PCR反应参数 3 1.2.5 PCR产物的检测 3 1.2.6 基因序列的测定与比对 3 2结果与分析 3 2.1病变组织中P36基因PCR检测结果 3 2.2 P97基因的扩增结果 4 2.3产物序列分析 4 3讨论 5 参考文献 6 致 谢 7 垦区猪肺炎支原体P97基因的检测 猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae，Mhp）是猪支原体肺炎（Mycoplasmal pneumonia of wine，MPS）的主要病原。猪支原体肺炎是一种慢性、接触性传染病，具有高发病率和低病死率的特点[1]，被认为是拉开肺脏感染其它病原体序幕的一个重要的因素。 据杨俊杰等[2]对新疆北疆地区规模化猪场进行的血清学调查结果显示：猪肺炎支原体的感染情况比较严重。而目前针对北疆地区Mhp流行株的基因分子遗传信息等方面的研究报道很少，流行株的来源和变异基本情况本底不清，使该病的免疫预防工作带有很大的盲目性。