技能学实验设计.doc

机能学实验设计大纲 实验名称 ： 抗生素对肺炎双球菌的抗感染治疗作用 课题来源 ： 自选 设计班级 ： 2011级护理本科一班 设计人员 ： 代莹莹 设计日期 ： 2012年12月1日 指导老师 ： 荣成 成都医学院实验技术教研室 20012年制 一、实验设计的目的意义：实验设计的目的意义，国内外研究现状，存在的问题，解决问题的思路。 目的与意义:建立小白鼠肺炎双球菌感染——败血症模型，深入肺炎双球菌转化的研究。本模型通过腹腔注射含有肺炎双球菌的试剂造成小白鼠败血症感染模型，通过是否注射青霉素G试剂，动态检测手术后不同时间段的心率，血压及心电图，对该实验进行全面客观的评价。 国内外研究现状：肺炎双球菌肺炎是肺炎双球菌引起的肺炎。５%～６０%的正常人平时鼻咽部带有肺炎双球菌，但并不发病，在感冒、过度疲劳后机体抵抗力下降时，细菌可引起肺内感染而导致本病。本病多见于青壮年，是比较常见的疾病。本病起病急骤，往往在发病前有感冒病史。肺炎双球菌转化实验中，格里菲斯以R型和S型菌株作为实验材料进行遗传物质的实验，他将活的、无毒的RⅡ型（无荚膜，菌落粗糙型）肺炎双球菌或加热杀死的有毒的SⅢ型肺炎双球菌注入小白鼠体内，结果小白鼠安然无恙；将活的、有毒的SⅢ型（有荚膜，菌落光滑型）肺炎双球菌或将大量经加热杀死的有毒的SⅢ型肺炎双球菌和少量无毒、活的RⅡ型肺炎双球菌混合后分别注射到小白鼠体 内，结果小白鼠患病死亡，并从小白鼠体内分离出活的SⅢ型菌。格里菲斯称这一现象为转化作用，实验表明，SⅢ型死菌体内有一种物质能引起RⅡ型活菌转化产生SⅢ型菌，这种转化的物质（转化因子）是什么?格里菲斯对此并未做出回答。1944年美国的埃弗雷(O．Avery)、麦克利奥特(C. Macleod)及麦克卡蒂(M．Mccarty)等人在格里菲斯工作的基础上，对转化的本质进行了深入的研究（体外转化实验）。他们从SⅢ型活菌体内提取DNA、RNA、蛋白质和荚膜多糖，将它们分别和 RⅡ型活菌混合均匀后注射人小白鼠体内，结果只有注射SⅢ型菌DNA和RⅡ型活菌的混合液的小白鼠才死亡，这是一部分 RⅡ型菌转化产生有毒的、有荚膜的SⅢ型菌所致，并且它们的后代都是有毒、有荚膜的。 肺炎双球菌是一种革兰式阳性的双球菌，细菌表面的荚膜多醣与治病率有关，主要会引起肺炎、中耳炎、菌血症、脑膜炎等死亡率极高，国内约每一千人中就有11~12人曾感染肺炎双球菌，特别严重的是如果儿童感染此症死亡率更是可以高达40%。另外，患有鎌球性贫血的儿童，其罹患肺炎双球菌脑膜炎的机会是一般儿童的600倍。 存在的问题：传统上治疗肺炎双球菌均是红霉素，四环素等，磺胺为主，然而确有半数以上的肺炎双球菌菌珠己对产生抗药性，无法治疗改疾病，所以当罹患严重的肺炎双球菌感染发生时，几乎没有一种抗生素能保证有效治好病人，以致于死亡率非常高。 解决问题的思路：对感染肺炎双球菌肺炎的小白鼠分别注射青霉素G，红霉素，四环素和磺胺类试剂，观察小白鼠的恢复时间和恢复状况，通过分别对比其治疗效果，得到治疗肺炎双球菌肺炎的最佳治疗方案。 参考文献： （1） 李贻奎； 李建生； 杨戈； 张杰； 郭盛典； 童丽。肺炎双球菌肺炎老龄大鼠急性反应相蛋白和自由基代谢变化与毒素清对其作用(摘要)。全国第六届中西医结合呼吸病学术研讨会论文汇编。R563.1;R285 。 （2） 魏龙晓。博莱霉素与肺炎双球菌致大鼠肺损伤过程中TGF-β1和VEGF表达的比较研究。人体解剖与组织胚胎学。183--199. （3）姜燕； 王永艳。阿奇霉素与胆木注射液联合应用对肺炎双球菌作用的研究。河北医药,Hebei Medical Journal。2012年17期。 二、实验设计方案（实验设计目标,拟解决的主要问题, 实验动物设计,实验专业设计，实验统计设计,实验方法设计，可行性分析,预期结果，实验设计工作时间安排）。 （一）实验设计目标，拟解决的关键问题 设计目标：研讨注射含有肺炎双球菌试剂的小白鼠通过分别注射不同抗生素会产生的治疗结果，从而找到一种较为理想的动物模型复制的方法。从而确定治疗肺炎双球菌肺炎的最好抗生素药物，为人类治疗肺炎双球菌肺炎做出贡献。 拟解决的关键问题：肺炎双球菌感染--败血症动物模型的制备；肺炎双球菌感染--败血症模型进行分组分别注射不同抗生素，与实验资料的统计分析。 （二）实验设计 1、实验动物设计 我们选用家小白鼠作为实验动物，有以下几点理由： 1）小白鼠因为其颜色的原因，在试验中很容易发现异常 。 2） 现代医学研究的小白鼠都是近亲繁殖的小白鼠，避免了因为遗传变异影响带来的 实验影响。 3）小白鼠因其与人的生理机能相似，可以作为人体实验的替代。 4）小白鼠价格便宜，个头小，可以满足多次试验反复取材的需要。 2、实验专业设计 选用小