呼吸道标本采集和结果解读-1.ppt

* * * * Sputum gram stain shoing epithelial cells and Gpc in chains * 痰培养标本质量情况 　 总数 不合格 不合格率 儿科 9 7 77.78% 内科 2620 1883 71.87% 急诊 644 441 68.48% 血液科 1501 1020 67.95% 外科 397 267 67.25% 妇产科 23 13 56.52% 门诊 267 150 56.18% ICU 1215 557 45.84% 13家医院，痰标本合格率不足50% * 粒缺患者肺炎的致病菌 Curr Opin Pulm Med 2015, 21:260–271 * 对于确诊IA：GM的诊断效能 Curr Opin Pulm Med 2015, 21:260–271 * 粒缺肿瘤肺炎：微生物学评价 BAL是很好的诊断工具 Curr Opin Pulm Med 2015, 21:260–271 * 恶性粒细胞减少患者的肺炎诊断 临床评估+微生物学评估+分子 微生物学评估： ①最可靠：从无菌部位分离or呼吸道分泌物中非共生菌 ②BAL是首选下呼吸道标本，越早采集越好，尤其使用抗生素之前，但不能延误治疗 ③支气管活检（TBBX）可揭示侵入血流感染，但培养不优于BAL，且因为恶性粒细胞减少继发血小板减少使得并发症风险高 ④分子方法：半乳甘露聚糖分子试验测试侵袭性曲霉病（FDA已经批准） Scott E. Evans and David E. Ost, Pneumonia in the neutropenic cancer patient, Infectious diseases, 2015,21(3):261-271 * 日均痰标本与BAL送检对比 * BAL标本量要求 生理盐水总灌入量不少于100ml，分3-5份进行（标准为200-240ml，分4等份进行） 好的BAL标本，至少30%灌入液回收 30%回收率的被视作不合格，需要重新采集（尤其是10%回收率的标本） Meyer KC, An official American Thoracic Society clinical practice guideline: the clinical utility of bronchoalveolar lavage cellular analysis in interstitial lung disease, Am J Respir Crit Care Med. 2012 May 1;185(9):1004-14 * 肺泡灌洗液标本的优点 BALF 标本培养的阳性率高，合格率高 BALF 的采集不需要患者的配合【1】 BALF能避免上呼吸道的定植菌的污染，减少对培养结果判断的干扰。 * 1. American Thoracic Society, Infectious Diseases Society of America. Guidelines on the Management of Community-Acquired Pneumonia in Adults, 2007:44 (Suppl 2) * 肺泡灌洗液标本的处理 * 将所有标本装入50ml离心管内 漩涡震荡30-60s 每个平板定量涂10μL Use pipette. 用吸管吸取0.1ml至1mlTSB （1：10稀释） 生长出10个菌落 培养后菌落计数： 相同形态菌落数×103CFU/mL 制作涂片 （细胞离心) 血平皿 巧克力平皿 麦康凯平皿 若用接种环密涂平板， 生长的菌落数量会低于实际数量。但用 L 棒涂布平板计数， 定量培养结果更准确 * 肺泡灌洗液的涂片革兰染色 适量BALF标本进行细胞离心，经自然干燥、甲醇固定或火焰快速固定3次，革兰染色 标本质量判断以扁平鳞状上皮细胞占全部细胞比例1% 为合格标本 敏感度为104个细胞/mL，若每个油镜视野可见1个或多个细菌，报告革兰染色形态及白细胞结果，提示此菌与活动性肺炎相关。 * Patrick RM. Manual of clinical microbiology. 9th ed. US: ASM Press, 2007: 307- 308 中华人民共和国卫生行业标准——下呼吸道感染细菌培养操作规范[S]. * 肺泡灌洗液定量培养的意义 细菌性感染，浓度阈值104CFU/mL，低于阈值浓度时，定植可能性大; 高于阈值时，感染可能性大。 真菌性感染，目前没有BAL的诊断性阈值。 丝状真菌也没有阈值。但丝状真菌在呼吸道分泌物中的价值远大于酵母菌属。该类菌在 EORTC /MSG 指南中有“临床诊断( probable diagnosis)”价值 * 1. A