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植物组织培养资料 植物组织培养复习题 1.狭义的植物组织培养和广义的植物组织培养。 狭义的植物组织培养，对植物小块组织的培养。 广义的植物组织培养，泛指将植物体的各种结构成分（如植物细胞、植物原生质体、植物组织以及植物器官）甚至幼小植株放在离体的、无菌的人工环境中让其生长发育的方法。由于培养的对象大多是脱离母体的外植体，培养的器皿一般是在试管内，所以植物组织培养也叫离体（体外）培养或试管培养。 2. 植物组织培养的理论依据 其理论依据是植物细胞具有全能性。 细胞全能性是指植物体任何一个细胞都携带着一套发育成完整植株的全部遗传信息，在离体培养情况下，这些信息可以表达，产生出完整植株。 全能性的表现：受精卵（正常的分化）离体组织或器官（人工的诱导） 3.植物胚胎培养的主要几个内容。 胚培养、胚珠培养、胚乳培养、试管受精 4.植物器官培养有哪些类别？ 离体根培养、离体茎培养、离体叶培养 5.植物组织培养实验室的设计及各分室的仪器作用。 通用实验室、无菌操作室（接种室 ）、培养室、细胞学实验室 至少需要有两个隔开的房间：一间用于玻璃器皿的清洗和贮存，以及培养基的制备(培养基室)，第二间用于放置培养物(培养室)。工业化生产则还需有相应的发酵设备及用于栽培试管苗的专用花房或遮荫棚等。实验室的大小和设置可根据自己的工作性质和规模自行设计，其中最主要的是无菌操作室（接种室）和恒温培养室。 一、通用实验室 主要用于植物组织培养所需器具的洗涤、干燥和保存，培养基的配制、分装和灭菌，化学试剂的存放及配制，重蒸馏水的生产，待培养植物材料的预处理及培养物的常规生理生化分析等操作。为了配制各种培养基，室内必须有一个较大的平面工作台及供放置各种培养器具的橱柜。 二、无菌操作室（接种室 ） 接种室主要用于植物材料的消毒和接种，培养物的继代转移等等。它应是无尘、无对流空气的非常洁净的实验室。要求进入室内的工作人员的衣物、鞋帽、头发、手和脸都要十分清洁，避免带入杂菌造成污染。如果能换上工作服、工作帽和拖鞋，更是理想。主要仪器与设备：无菌操作台，紫外灯，换气扇，空调。 无菌操作室最好设有内外两间：外间是缓冲间，内间是无菌操作室。缓冲间可使工作人员进入无菌操作室前有一个过渡，以减少将室外杂菌带入无菌操作室。缓冲室中可放置工作服、工作帽、拖鞋等，亦可用紫外灯随时进行灭菌。 三、培养室 培养室是培养试管苗的场所，要满足外植体生长所需的温度、光照、湿度和气体等条件。室内主要应有培养架和控制温度和光照的设备。小型则用培养箱。 *常用设备和器材 一、灭菌设备——高压蒸气灭菌锅它是组织培养中最基本的设备之一，用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒等。目前有大型卧式、中型立式、小型手提式和电脑控制型等多种，可依据自身的工作规模和财力来选用。 小型手提式蒸气灭菌锅（内热式 ） 、中型立式灭菌锅 二、接种工具 双筒实体显微镜——多用于剥制植物茎尖。 镊子——尖头镊子适用于解剖和分离叶表皮时用；枪形镊子，由于其腰部弯曲，适合于用来转移外植体和培养物。 剪刀——有大、小解剖剪和弯头剪，适合于剪取外植体材料。 解剖刀——有活动的和固定的两种。前者可以更换刀片，较适用于分离培养物；后者则适用于较大外植体的解剖用。 酒精灯——用于金属接种工具的灭菌和在其火焰无菌圈内进行无菌操作。 三、培养设备 培养设备是指专为培养物创造适宜的光、温、水、气等条件的设备，包括： 空调机——供升温及降温用。 温度控制器——供恒温用。 增湿机或去湿机——供改善培养室湿度用。 摇床或旋转床——在进行液体培养时，培养材料浸入溶液中，会引起氧供应不足。为改进通 气条件，常用旋转床或摇床。 全温摇床 照度计 湿度计、温度计 培养架——供放置培养瓶用，培养架的框子用木制或三角铁制皆可，但应漆成白色或银灰 色，每层隔板可用玻璃或木材制成，但以玻璃板的光照效果好。 日光灯——供光照之用。 光照培养箱——供光照培养用，多用于外植体分化培养和试管苗生长之用，有可调湿和不调 湿的两种规格。 光照培养箱 四、化学实验及分析设备 天平——其中药物天平和扭力天平用于大量元素、琼脂和蔗糖等的称量。 酸度计——培养基中的pH值十分重要，因此在配制培养基时需要用酸度计来测定和调整培养基的pH值。 蒸馏水器——在植物组织培养中常要求使用蒸馏水或去离子水。 烘箱或玻璃仪器烘干器——洗净后的玻璃器皿，如需迅速干燥，可放在烘箱内或玻璃仪器烘干器上烘干。 电炉——供加热用。 药品柜——供放置药品用。 冰箱——用途有多方面，如试剂和母液的保存，试验材料的冷处理，种子和种质材料的冰冻贮藏等。 大、小水槽——供洗涤玻璃器皿用。 晾干架——供放置玻璃器皿用。 废污物桶——供暂