玉米沙培预实验计划玉米沙培预实验计划.docx

玉米沙培预实验计划实验材料：试验材料选用RIL群体中的亲本P1、P2，C5 P1XP2 RIL 64（编号11MR047）、C5 P1XP2 RIL 156（编号11MR115）、C5 P1XP2 RIL 163（编号11MR122）、C5 P1XP2 RIL 197（编号11MR149）共6个材料。实验分处理组和对照组，每个材料包括6盆处理，6盆对照（材料C5 P1XP2 RIL 64包括12盆处理，12盆对照），每盆种植5株。试验包括一个重复。实验方法：每盆中点播7颗种子，盆中基质由细砂组成。按正常量浇水发苗，当苗子长至三叶一心的时候，进行匀苗，去除掉盆中长势较差的两株。处理组从三叶一心开始停止浇水，对照组保持正常浇水。等苗子处理10d后（对照组植株长至约5-6叶时），处理组和对照组各取3盆进行冲根与各项指标的测定。剩余3盆进行复水后，进行各项指标的测定。玉米地下部分指标（复水之前材料）处理组与对照组各取3盆中的12株植株，用水快速将细砂冲洗掉，后将地下部分和地上部分分开。数量加倍的材料C5 P1XP2 RIL 64冲根时，其中的一半材料用清水直接冲洗，另一半先用含PEG的水进行冲洗后，再用清水冲洗。1.1 根长、根表面积、根体积、根尖总数、根直径在0.5mm之内的根长进行根系扫描，获得12株植株的根长、根表面积、根体积、根尖总数、根直径在0.5mm之内的根长的平均值。1.1.2 最长根长用尺子测定最长根长。1.1.3 地下部分的鲜重和干重测定地下部分的鲜重和干重。测定干重时，在105℃杀青30分钟后，于75℃烘干至恒重。玉米地上部分指标（复水之前材料）处理组与对照组各取其中3盆中的12株植株，取其地上部分。2.1 可见叶片数对12株植株的可见叶片数进行计数，取平均值。2.2地上部分的鲜重和干重测定地上部分的鲜重和干重。测定干重时，在105℃杀青30分钟后，于75℃烘干至恒重。2.3根冠比地下部分的干重与地上部分的干重的比值。2.4 株高叶片带有可见的叶枕部位定义为成熟叶，从植株的顶部开始对成熟叶进行编号。在处理开始之前，从土表面开始到第一片成熟叶片的叶尖，得到初始株高Ho。处理结束后，测得株高为He。处理后植株的生长量为Hi，He – Ho = Hi。用植株生长百分率代表干旱对植株的影响，[(Hed – Hod) ÷ (Hew – How)] × 100%，其中d代表处理组的植株，w代表对照组的植株。2.5 叶片存活率处理结束后，统计死亡叶片数。死亡叶片数占总叶片数的比率为叶片存活率。2.7生物学产量使用Greenseeker对植株进行生物学产量的测定。2.6 相对水含量处理组与对照组中的3盆中各随机留下一株，用于取材（这3株不用于测量其他指标）。分别于处理开始前1天与处理10d结束时，在第二片成熟叶中间部分取一块2*4cm的叶片（约0.5g）。将取下的叶片放入5mlEP管后放入冰盒中冷藏。EP管的重量为W1，装有叶片的EP管的重量为W2，得到取样的叶片的鲜重FW=W2-W1。每管样品加入4ml的蒸馏水后放入4℃的冰箱中24h，得到肿胀重量TW。然后放入65℃的烘箱3d，得到干重DW。因此相对水含量：[(FW – DW) ÷ (TW – DW)] × 100 %= RWC。2.7 相对电导率在专门用于取材的3株苗子上取样。分别于处理开始前1天与处理10d结束时，在第二片叶子的中间部分取一块2*4cm的叶片，将叶片剪成1cm的小片段。在水中浸泡3h后，用电导仪测定得Ec1。随后沸水浴10min，冷却至室温，用电导仪测定得Ec2。相对电导率REC =Ec1/Ec2*100%。2.8 叶绿素测定使用SPAD叶绿素计对3盆中的12株植株进行测定。选用叶片为每株植株的第二片成熟叶，每个叶片在不同部位测量3次（避开叶脉部分）取平均数。在处理开始前一天和处理后的4d，7d，10d分别进行测定。2.9 光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度和蒸腾速率在处理开始前一天和处理10d结束当天，利用LI-6400 XT便携式光合测定仪测定第一片成熟叶光合作用相关参数，包括光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度和蒸腾速率。设置默认参数，各材料的处理组与对照组随机测定三株，测定时间为12:00-14:00。2.10 可溶性糖处理10d后取样测定。标准曲线制作取20mL刻度试管11支，从0~10分别编号，按下表加入溶液和水。然后按顺序向试管中加入0.5mL蒽酮乙酸乙酯试剂和5mL浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管准确保温1min取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm波长下测其光密度，以光密度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。试剂管号01、23、45、67、89、10100μg/l蔗糖溶液/ml00.20.40