环境对微生物生长的影响环境对微生物生长的影响.doc

环境对微生物生长的影响 一.实验目的：? 1.?了解温度对微生物生长的影响；? 2.了解渗透压对微生物的影响；? 3.?了解某一抗生素（链霉素）的抗菌范围，学习抗菌谱试验的基本方法。? 二.实验原理：? 1.?温度:?温度是影响微生物生长与存活的最重要因素。自然界的微生物可根据对温度的适应性分为低温型、中温型和高温型。但不管哪一种温度型的微生物，都有生长温度范围。分为最高、最适和最低生长温度。在最适宜温度里生长良好：超过最高温度细胞死亡；低于最低温度细胞被抑制或死亡。? 温度对微生物影响的实际应用：应用上利用高温进行杀菌；低温抑制微生物；最适温度培养微生物的活动。? 高温加热灭菌法有火焰灼烧；煮沸消毒；干热空气灭菌；高压蒸汽灭菌等。高温? 干热致死机理：主要由于细胞内蛋白质受热变性，蛋白质结构发生变化而凝固等。高温热致死的影响因素有致死温度、高温时间和微生物的耐热性能。一般情况下，病原微生物细胞最不耐热，而霉菌和放线菌的孢子、细菌芽孢最耐热。? 低温下多数微生物处于被抑制状态。病原菌和一些微生物在低温下也易死亡。其致死机理为细胞内外水份结成冰，冰晶对细胞造成损伤破坏作用。因此，应用上低温可以用来保存食品，和在有一定措施条件下进行保存菌种。 ? 2.渗透压的影响：在等渗溶液中，（环境渗透压和细胞内渗透压相同或相近，细胞在等渗环境中生长好，如0.85％氯化钠——生理盐水），微生物正常生长。在高渗溶液（如高盐、高糖溶液中），细胞失水收缩，从而抑制了微生物体内的生理生化反应，抑制其生长繁殖。而在低渗溶液中，由于细胞壁的保护作用，微生物受低渗的影响不大。? 不同类型的微生物对渗透压变化的适应能力不尽相同，大多数微生物在0.5％3％的盐浓度范围内可正常生长，10～15％的盐浓度能抑制大部分微生物的生长，但对嗜盐细菌而言，在低于15％的盐浓度环境中不能生长，而某些极端嗜盐菌可在盐浓度高达30％的条件下生长良好。? 本实验选择了金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作为实验菌种，其中大肠杆菌耐高渗透压的能力较差，在3%以下的NaCl下能正常生长，以5%的NaCl下即受到抑制；金黄色葡萄球菌有较强的耐盐能力，它在10%的NaCl溶液中仍能正常生长，因此实验选择了0.85%、5%、15%的NaCl溶液浓度作为实验浓度。? 3.?抗生素的影响：抗生素是某些微生物在生长代谢过程中产生的能抑制或杀死其它微生物的次生代谢产物。每种抗生素都有它固定的抗菌范围和抗菌谱，例如青霉素只对革兰氏阳性菌具有抗菌作用，多粘菌素只对革兰氏阴性菌有作用，这类抗生素称为窄谱抗生素；另一些抗生素对多种细菌具有作用，例如四环素、土霉素对许多革兰氏阳性菌和阴性菌都有作用称为广谱抗生素。? 本实验选择了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌作为实验菌种，选择了链霉素作为实验抗生素。通过实验观察这种抗生素的抑菌范围。? 三.?实验用品：参考实验教材上的实验用品。? 四.?实验内容（三人一组）：? 1、每组分别倒制含有0.85%、5%、15%的NaCl浓度的肉膏蛋白胨培养基平板，于实验桌上静置待其凝固。其中含有0.85%NaCl浓度的倒制两块平板。【每组共四块平板，0.85％的2块、5%、15%的各一块】? 2.?从斜面上刮取大肠杆菌、枯草芽孢杆菌分别放入10mL无菌水中，制备成菌悬液，于沸水浴中煮沸10min后备用。? 3.?取一块已经凝固的0.85％NaCl浓度的平板分成6等分，分别用接种环接种没有经沸水浴的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌斜面，和经过沸水浴的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌菌悬液；并在平板底相相应地标记好，于37℃倒置培养2天观察平板上的细菌生长情况。从而观察它们对温度敏感性的差异，思考产生这种差异的原因。? 4.?将已经凝固的5%、15%的NaCl浓度的肉膏蛋白胨培养基平板用记号笔分区划分为两等分，分别接种大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，并在平板底相相应地标记好，于37℃倒置培养2天观察平板上的细菌生长情况。从而观察它们对渗透压敏感性的差异。? 5.?用无菌镊子取无菌滤纸条一条，浸入链霉素溶液中，润湿，并在容器内壁沥去多余溶液，再将滤纸条贴在已经凝固的另一块0.85％NaCl浓度的平板上。? ???注意：滤纸条上含有的溶液不要太多，而且在贴滤纸条时不要在培养基上拖动滤纸条，避免抗生素溶液在培养基中扩散时分布不均匀。? 6.?无菌操作，用接种环，从滤纸条边缘分别垂直向外直线接种大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌。于37℃倒置培养2天观察并记录平板上的细菌生长情况。 ? ??注意：划线接种时要尽量靠近滤纸条，但不要接触，避免将滤纸条上的抗生素溶液与菌种混合。? ? ? 五.备注：? 引子：青霉素是抗菌素的一种，是从青霉菌培养液中提制的药物，是第一种能