微生物与发酵工艺..ppt

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微生物与发酵工艺.

微生物与发酵工艺 实训一 显微镜的使用和微生物测微技术 一、实验目的 1. 练习和掌握显微镜的使用方法(低倍镜、高倍镜、油镜)。 2. 掌握使用测微尺测定微生物大小的方法,熟悉微生物大小的一般概念。 二、实验原理 (一)显微镜的结构、光学原理和操作方法 1.显微镜分机械系统和光学系统两部分 机械系统包括:镜筒、转换器、载物台、镜臂、镜座、粗准焦螺旋、细准焦螺旋。 光学系统包括:目镜、物镜、聚光器、光源、滤光片、虹彩光圈。 (二)显微镜的光学原理 1.成像原理 光路:光源→虹彩光圈→聚光镜→通光孔→标本(一定要透明)→物镜→镜筒→目镜→眼。 (三)油镜工作原理 香柏油的折光率(1.51-1.52)与玻璃 片折光率(1.52)相近似,因此在物镜(玻璃)与标本载片(玻璃)之间加入香柏油可以使光线不致因从一个介质(玻璃)进入到另一折光率不同的介质即空气(折光率为1.0)而引起部分散射,造成亮度不够而观察不清,这对透镜弯曲度较大,直径较小(通过光线亦较小)的油镜头是特别重要的。 做法是在用油镜观察时要把油镜头(100×)浸入香柏油中。 1.物测微尺 物测微尺是一厚玻片,中央有一圆形盖玻片,中央刻有1mm长的标尺,等分为100格,每格100μm,用以标定目测微尺,在不同放大倍数下每格的实际长度。 2.目测微尺的标定 将目测微尺装入目镜的隔板上,使刻度朝下;把物测微尺放在载物台上使刻度朝上。用低倍镜找到目测微尺的刻度,移动物测微尺和目测微尺,使两者的第一条刻度线重合,顺着刻度找到另一条重合刻度线。计算在该放大倍数下目测微尺每个小格的实际长度。 目测微尺每小格长度(μm)= 用物测微尺标定目测微尺 三、实验材料和用具 四、实验方法 四、实验方法 2.低倍镜的操作 ①置显微镜于固定的桌上,接通电源,打开光源。 ②将标本片放在载物台上,是观察的目的物处于圆孔的正中央。 ③将粗准焦螺旋向下旋转,眼睛在测向注视物镜,防止物镜和载玻片相碰。 ④张开双眼向物镜里观察,如果见到目的物,但不十分清楚,可用细准焦螺旋,至目的物清晰为止。注意观察时两眼应同时睁开。使用单筒显微镜,应习惯用左眼观察,以便绘图。 四、实验方法 3.高倍镜的操作 ①使用高倍镜前,必须先用低倍镜观察,发现目的物后将它移至视野正中处。 ②旋动转换器换高倍镜。如果高倍镜触及载玻片立即停止旋动,这说明原来低倍镜并没有调准,目的物并没有真正找到,必须用低倍镜重新调节。如果高倍镜下观察目的物有点模糊,调节细准焦螺旋,直到视野清晰。调节细准焦螺旋时要注意旋转方向与载物台上升或下降的关系,防止镜头与载玻片强力接触,损坏镜头或载玻片。 四、实验方法 4.油镜的操作 ①如果用高倍镜目的物未能看清,可用油镜。先用低倍镜和高倍镜检查标本片,将目的物移到视野正中。 ②在载玻片上滴一滴香柏油(或液体石蜡),将油镜移至正中使油镜头浸没在油中,刚好贴近载玻片。用细准焦螺旋微微向上调(切忌不用粗准焦螺旋)即可。 ③油镜观察完毕,用油镜纸将镜头上的油揩净,另用擦镜纸蘸少许二甲苯揩拭镜头,再用擦镜纸揩干。 5.显微镜使用注意事项 Ⅰ.显微镜应置于平坦的桌面上。 Ⅱ.将标本片夹在显微镜载物台的十字夹中,注意要正面向上。 Ⅲ.先用低倍镜再用高倍镜观察寻找目的物,此时要控制视野不能太亮,注意区别镜头上的灰尘和目的物。 Ⅳ.在标本中央滴加一小滴香柏油,从镜筒侧面观察,将油镜(100×)轻轻旋下,使它浸在香柏油内。切勿猛烈的将镜头压在标本片上,防止损坏物镜! 四、实验方法 Ⅴ.将眼睛移至目镜,一边观察一边慢慢旋动粗准焦螺旋,将载物台上提。当见到物象时,再用细准焦螺旋调至图像清晰。对于单目显微镜,使用油镜时要将聚光器尽量上升,虹彩光圈放大。 Ⅵ.注意在旋动粗准焦螺旋时,必须特别小心。决不能在观察时将载物台很快提升,以免损伤螺旋。 Ⅶ.假如用油镜时一再看不清目的物,可验看油中是否存在气泡。如存在气泡,可将镜头及标本片上的油擦去,重新滴加。 四、实验方法 Ⅷ.观察完毕后,下降载物台,取下标本片,用干净的擦镜纸蘸少量的二甲苯,轻揩去载玻片上的香柏油后,立即用干擦镜纸揩干。 Ⅸ.收存显微镜时,应将最短的镜头对准透光孔,或将物镜的长镜头转成“八”字式,使两个镜头同时搁在载物台上。切勿将长镜头对准透光孔,以免与聚光器相碰而损坏。镜台、镜身上占有水及污物,必须及时擦去。然后套上显微镜罩,对号放入显微镜箱中锁好。 (二)微生物测微 1.分别在低倍镜、高倍镜和油镜下进行目测微尺的标定。 2.菌体大小的测量 将物测微尺取下,换上标本片,选择适当的物镜测量目的物的大小,分别

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