生物工程讲座论文生物工程讲座论文.doc

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华东理工大学 学年第 学期 研究生《 生物工程学术讲座 》课程考试试卷 年月 开课学院: 生物工程学院 任课教师: 考生姓名: 学号: 成绩: 论文题目:生物发酵过程中pH值的影响与检测控制 论文要求: 教师评语: 教师签字: 年 月 日 摘 要 pH值是生物发酵过程中一个重要的变量,发酵生产中必须对它进行准确的测量并实施正确的监控。pH是微生物代谢的综合反映,又影响代谢的进行,所以是十分重要的参数。发酵过程中pH是不断变化的,通过观察pH变化规律可以了解发酵的正常与否。本文总结了pH值在发酵过程中的影响、变化规律,如何控制与检测,与其他参数之间的关系以及必威体育精装版研究进展,为pH值近期相关研究的综述。 关键词:pH值; 控制; 检测 1 前言 微生物发酵过程是生物技术产业化中的一个重要环节,直接影响着生物制品的数量、质量和生产成本。而在发酵过程中,pH值对微生物生长繁殖和代谢产物合成有着非常重要的影响,是生物发酵过程需要掌握的重要状态参数。 发酵液的pH值是影响微生物生长的一个重要因素,同一种微生物在不同的生长阶段和不同的生化过程中,对环境的pH值也有不同的要求。不仅如此,即使是同一种微生物,由于pH值的不同,可能会产生不同的发酵产物。例如,研究中发现,大肠杆菌合成聚唾液酸受到环境pH值的显著影响[1],在发酵培养基中加入高质量浓度磷酸盐( 20 g/L磷酸氢二钾) 缓冲pH值,可使聚唾液酸产量达到1.9 g/L[2]。酵母菌最适成长pH值为4.5~5.0,此时发酵产物主要是酒精;但在pH值为8.0 时,发酵不仅产生酒精还有醋酸和甘油。而利用厌氧活性污泥作产氢接种物,发酵有机质产生氢气,一般是在酸性条件下进行的,较为适宜的产氢pH 值范围4. 5~ 5. 5[3]。 2 pH值在发酵过程中的变化规律 2.1 影响发酵液pH的因素 发酵过程中pH值受许多过程因素(如加碱量、通气量、搅拌速度、温度、罐压等)的影响,且不同的发酵阶段对pH值的要求有很大的不同。[4]在发酵过程中,因于细菌对营养物质的不断吸收、利用和代谢物的不断积累,发酵液的pH值会不断起变化。当尿素被脲酶分解放出氨和有机氮源被利用产生氨时,会使发酵液的pH 值上升。当氨被菌体利用及糖被利用生成有机酸等中间代谢产物时,又会使发酵液的pH值下降。影响pH值变化的主要因素有:(1)营养物质的分解与利用;(2)酸性或碱性代谢物质的形成;(3)培养基比例失调;(4)杂菌污染。 2.2 pH变化规律 在微生物细胞的生长阶段:(1)初期 接种后到孢子萌发,因碳氮源代谢水平比较低,pH一般可维持不变,或者由于添加了CaCO3而略有上升。(2)快速生长期:pH值变化较大,因菌种及培养基不同而上升或下降。在生产阶段,一般发酵液的pH值趋于稳定,维持在适合产物形成的pH范围。在微生物细胞自溶阶段,养分的耗尽,菌体蛋白酶的活跃,培养液中氨基氮增加,致使pH又上升。 3 发酵过程中pH值控制与检测 3.1 发酵过程中常见问题及控制 微生物生长的pH值三基点:各种微生物都有其生长的最低、最适和最高pH值。低于最低、或超过最高生长pH值时,微生物生长受抑制或导致死亡。不同的微生物最适生长的pH值不同,根据微生物生长的最适pH值,将微生物分为: 嗜碱微生物:硝化细菌、尿素分解菌、多数放线菌 耐碱微生物:许多链霉菌 中性微生物:绝大多数细菌,一部分真菌 嗜酸微生物:硫杆菌属 耐酸微生物:乳酸杆菌、醋酸杆菌 发酵初期pH值过低,其主要原因可能是:加氨量不够;通气量不够;培养基起始pH低;二级种子生长不良或种量太少或菌种的活性太差。处理方法应根据分析的确切原因,采取以下对应措施:提前酌情流加液氨;检查流加液氨有关管路、阀门等设施;以后配料时,要准确调pH 值和按程序加磷盐、镁盐;加大二级种子种量;适当提高风量;分纯菌种。 发酵前期pH值过高,其原因可能是:发酵前期的通气量过大,或轴封漏气;感染了噬菌体;培养基营养贫乏,生物素、磷、钾少加或漏加;种子培养初期受高温影响;培养基起始pH过高。处理的方法应根据分析的确切原因,可采取如下一种或数种并用的相应措施:适当减少通气量,直至暂时停止搅拌,小通风,使菌体生长,pH 值下降直至正常后再适量通风;根据情况补加适量生物素和磷盐、镁盐;补加种子(种子损伤严重,pH 值长期过高,不会下降时);如经检查,确

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