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第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全 第一节 消毒灭菌的常用术语 消毒(disinfection) 利用理化因素杀死物体或环境中病原微生物的措施。并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物 灭菌(sterilization) 利用理化因素杀死物体上所有微生物的过程，包括芽胞。 防腐(antisepsis)：体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法 清洁（cleaning）：是指通过除去尘埃和一切污 秽以减少微生物数量的过程。 无菌(asepsis) 不存在任何活菌 无菌操作（aseptic technique)：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术 第一节 消毒灭菌的方法 一、物理消毒灭菌法 常用的有:热力、紫外线、辐射、超声波、滤过 干燥 低温 最重要的是热力 二、化学消毒灭菌法 热力灭菌法 2.影响湿热灭菌的因素(了解) (1)微生物因素: (2)温度与作用时间: (3)pH值的影响: (4)介质的性质: 辐射杀菌法 1、电离辐射 X、β、γ射线 原理:通过产生OH-、O2等活性游离基进行杀菌；通过破坏DNA的结构导致菌体死亡 2、非电离辐射 （1）紫外线 200~300nm 杀菌原理：导致DNA分子构型改变，导致DNA复制出现差错 用途与缺陷 只用于空气和物品表面的消毒，用时注意防护 （2）日光 能杀死大部分的微生物 （3）微波 常用于对非金属器械的消毒 滤过除菌法 1、贝克菲滤器 2、蔡氏滤器 3、玻璃滤器 4、膜滤器 孔径 0.22um-0.45um除菌25-100nm可去除病毒 空气过滤器:无菌棉花、活性炭及细玻璃纤维等 可对空气进行过滤除菌 干燥与低温抑菌法 抑菌和灭菌 常用冷冻法贮藏菌种 要注意: 迅速冷冻 加入冷冻保护剂 一般-20-70度 滤器和层流室 化学消毒灭菌法(外用) 常用消毒剂的杀菌机制 使菌体蛋白变性或凝固 干扰微生物酶系统和影响其代谢 损伤细胞壁、细胞膜 二、化学消毒灭菌法 （一）高效消毒剂 （high-level disinfectants） 1.含氯消毒剂；2.过氧化物消毒剂； 3.醛类消毒剂；4.环氧乙烷 （二）中效消毒剂 （intermediate-level disinfectants） 1.含碘消毒剂；2.醇类消毒剂 （三）低效消毒剂 （low-level disinfectants） 1.季铵盐类；2.氯已定；3.高锰酸钾 固体二氧化氯消毒剂 消毒剂的主要类型及应用 重金属盐类 1%硝酸银 氧化剂 0.1% 高锰酸钾、3%过氧化氢 酚 石炭酸 醇类 70-75%的乙醇 醛类 37%-40%福尔马林 卤素类 0.2ppm-0.5ppm氯,2.0%-2.5%碘酒 酸碱类 15%-25%生石灰、50%醋酸蒸发 表面活性剂 0.1%新洁尔灭 染料菌 2%-4%龙胆紫 烷化剂 50mg/L环氧乙烷 医学上常用消毒剂类型作用机制及种类 第三节 消毒灭菌的运用 （一）高危器械物品 用时需进入无菌组织 的物品。所有这些物品都应该灭菌。 （二）中危器械物品 用时不进入无菌组织 但接触黏膜的器械。采用消毒即可。 （三）低危器械物品 只接触未损伤皮肤但 不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。 一般用后清洗、消毒即可。 （四）快速周转的医疗器械 （二）室内空气消毒灭菌 1.物理消毒法 ①紫外线照射（1.5W/m3，1h）最常用；②滤过除菌：空气通过孔径小于0.2 μm的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃 2．化学消毒法 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸：①过氧乙酸喷雾、熏蒸；②过氧化氢喷雾；③二氧化氯溶液喷洒；④中草药点燃烟熏 （三）手和皮肤的消毒 用肥皂和流动水经常并正确洗手 病原微生物污染时应用消毒剂消毒。 （四）黏膜的消毒 （五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 （六）病人污染物品的消毒 （七）饮水的消毒 （八）环境的消毒 影响消毒灭菌效果的因素 消毒剂的性质、浓度与作用时间 微生物的种类与数量 温度 酸碱度 有机物 第四节 影响消毒灭菌效果的因素 一、微生物的种类 二、微生物的物理状态 三、微生物的数量 四、消毒剂性质、浓度与作用时间 五、温度 六、