花卉组培苗生产技术规程花卉组培苗生产技术规程.doc

花卉组培苗生产技术规程 花卉组培苗生产技术规程 1? 范围 本技术规程规定了河北省主要花卉组培苗生产环境的消毒灭菌、培养条件调控以及组培苗接种、继代、生根、移栽等的技术操作程序，并对其生产、试验设备、设施提出了具体要求。 本技术规程适用于河北省盆花和切花组培苗生产。 2 ?术语和定义 ??? 下列术语和定义适用于本标准。 2.1? 花卉 ??? 凡是具有一定观花、观叶、观芽、观茎、观果和观根等观赏价值，并经过技术和艺术进行栽培和养护的植物。 2.2? 植物组织培养 ??? 是指在无菌条件下，将离体的植物器官（如根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（如形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使它们得以继续生长、分化、形成完整植株的过程。 2.3? 花卉组培苗 ??? 以植物组织培养方法进行繁殖的花卉苗木称花卉组培苗。 2.4? 植物生长物质 ?? ?指一些调节植物生长发育的物质。包括植物激素和植物生长调节剂。 2.5? 外植体 ??? 用于组织培养的组织、器官、细胞及原生质体称为外植体。 2.6? 培养材料 ??? 生长在培养容器内培养基上的植物材料统称培养材料。 2.7? 培养基 ??? 在植物组织培养过程中，由人工配制的提供培养材料生长所必需的营养元素和某些生理活性物质的基质。 2.8? 接种 ??? 将外植体经消毒灭菌后，在无菌条件下放入培养容器内培养基上的过程。 2.9? 增殖 ??? 指外植体或继代组培苗产生出新的具有特定结构和功能的组织或器官的现象。 2.10? 继代 ??? 是指培养过程中将培养材料周期性地分株、分割、剪截等转接于新鲜培养基上进行增殖的过程。 3? 生产设备（施）及化学试剂 3.1? ?生产设备（施） 3.1.1 建筑设施 设计组培实验室或小型组培工 厂必须选择环境优静、无污染的地方并保证其生产过程中不对周围环境造成污染。实验室或小型组培工厂各部分的配置要合理，做到工作方便、使用安全、节省能 源。房屋设计包括准备室、接种室、培养室、洗涤室、实验室、贮存室、温室，另外还可配置办公室、更衣室等。 3.1.2? 生产设备 3.1.2.1? 洗涤设备 工厂化生产可选用自动或半自动洗瓶机，实验室或小型车间选用普通洗涤用具，如洗涤室水槽、塑料盆、塑料桶、塑料箱等，人工洗涤。另外配置干燥箱、晾瓶架等。 3.1.2.2? 灭菌设备 ??? 高压蒸汽灭菌锅（大型卧式、中型立式、小型手提式））、器械消毒器、紫外灯、烘干箱、微滤孔器等。 3.1.2.3? 接种设备及工具 ??? 超净工作台、镊子、剪刀、解剖刀、接种针、钢丝架、酒精灯等。 3.1.2.4? 培养设备 ??? 培养容器（三角瓶、罐头瓶、专制塑料瓶、试管等）、培养架、振荡和旋转培养机、空调、光照培养箱等。 3.1.2.5? 实验设备 ??? 冰箱、蒸馏水器、电子天平、架盘天平、pH 5.0～7.0精密试纸、酸度计、温湿度表、照度计、盛装器皿（烧杯、试剂瓶等）、计量器皿（量筒、容量瓶、移液管等）以及其他实验室常用器具等。 3.1.2.6? 细胞学观察设备 ??? 体视显微镜、解剖镜、高倍显微镜，有条件的还可购置显微照相设备、测微尺等。 3.2?? 常用化学试剂 3.2.1? 洗涤剂 选用无污染洗衣粉、洗洁精、去污粉等。 3.2.2? 灭菌剂 选用酒精、氯化汞、次氯酸钠、高锰酸钾、甲醛、过氧乙酸、新洁尔灭、来苏水、抗菌素等。 3.2.3? 无机盐类和有机物类 ??? 常用培养基如MS、B5、N6等大量元素和微量元素所规定的无机盐类和有机物类；或者根据试管苗生产所用培养基种类购置所需化学试剂。常见培养基成分见附录A。 3.2.4?? 植物生长物质 细胞分裂素：6～苄基氨基嘌呤（6～BA）、激动素（KT）、玉米素（ZT）、2～异戊烯腺嘌呤（2ip）等。 细胞生长素：吲哚丁酸（IBA）、萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、2,4～二氯苯氧乙酸(2,4～D)等。 赤霉素：GA3等。 乙烯：C2H4。 3.2.5? 碳水化合物 ??? 蔗糖或食用砂糖。 3.2.6? 固化剂 可选用以下任何一种：组培专用培养基固化剂、微生物多糖固化剂、琼脂等。 3.2.7? 培养基附加成分 为促进试管苗的生长，有时培养基中还可加入以下附加成分，氨基酸、水解乳蛋白（LH）300mg/L～500mg/L、水解酪蛋白（CH）200mg/L～500mg/L以及腺嘌呤(ADE)1mg/L～80mg/L等。 4? 消毒灭菌操作规程 4.1? 洗涤室的消毒灭菌 ??? 每天用来苏水、过氧乙酸等喷洒地面，保持室内清洁。 4.2?? 接种室的消毒灭菌 ??? 接种前用紫外灯照射20min～30min，并定期(一般7d)用高锰酸钾