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[污染控制第三章-3
第五节 微生物生长曲线及其在污染控制工程中的应用 一、生长曲线的概念 1.细菌群体生长特征 单细胞微生物的群体生长特征是指数生长。 2.生长曲线 二、混合微生物群体的生长 1.微生物的演替现象 活性污泥由多种微生物组成生物群体,每种微生物具有各自生长规律和生长曲线; 每条生长曲线在共栖环境中有自己的形状和位置; 例:有机物含量丰富,则以有机物为食的细菌数量多,然后必然以细菌为食的原生生物出现,最后以细菌和原生生物为食的后生生物才可能产生。 2.演替现象在废水处理中的意义 意义:定性地推测水质情况 鞭毛虫存在-有机物高,需处理; 镜检固着纤毛虫则有机物和细菌少; 轮虫出现说明水质稳定。 三、内源呼吸 1.内源呼吸的概念 在细胞内部,细胞物质的自身代谢即内源呼吸。 2.内源呼吸的特点 (1)内源呼吸贯穿微生物整个生命期; (2)内源呼吸在对数生长期影响极小,可以忽略,但在非对数生长期,内源呼吸的影响不能忽略。 四、生化反应动力学 1.反应动力学研究的主要目的 (1)探索影响因素与反应速度的关系,指导生产工艺; 底物降解速率和底物浓度、生物量等因素的关系; 微生物增长速率和底物浓度、生物量等因素的关系; (2)研究反应机理,以数学模型的形式抽象反应速度的本质; 2.米氏方程 (1)底物浓度和酶促反应速度的关系 底物浓度(Cs)与反应速度(v)的定量关系 该式为酶反应动力学的最基本方程式, 酶反应速度V: 取决于底物浓度Cs、米氏常数Km、和最大反应速度Vmax。Km为常数, 当反应体系中酶的总浓度不变时,Vmax也为常数,因此酶反应速度V主要取决于底物浓度Cs。 (1)底物浓度和酶促反应速度的关系 当底物浓度很低时:CsKm,Km+Cs≌Km,M-M方程: ,即v-cs为正比例关系,一级反应; 当底物浓度很高时:CsKm,Km+Cs≌Cs,M-M方程: ,即底物浓度与酶催化反应速度无关(酶活性部位已全部被底物占据)反应达到最大速率。呈零级反应。 当Cs≌Km时,反应级数介于0级与1级之间。 (2)米氏常数 Km-研究酶作用机制的一个重要特征常数 Km是酶的特征常数,反应了酶和底物之间的亲和力。一般以1/Km来表示亲和力。1/Km越大则酶与底物之间亲和力越大,表示酶催化反应更容易进行。反之,Km越大,则反应进行越困难。 (3)酶反应速度与酶浓度的关系 根据中间络合物理论和米氏方程,当底物浓度足够大时(CsKm时),V=k2CE0成立,即酶浓度与反应速度具有线性关系, 该结论对于酶的分离和提纯具有重要意义,例如A、B两种酶催化同一底物时,如果A0.2mol/L与B0.6mol/L催化反应速度相同,则认为A的活力是B的活力的3倍。 3.温度对催化反应速度的影响 (1)酶的最适温度 在较低的温度范围内,酶反应速度随温度升高而增大,但超过一定温度后,反应速度反而下降,此转折点温度称为“最适温度”。 最适温度不仅与酶本身特性有关,也同时受到酶纯度、反应条件、底物等多种因素影响,因此不是酶的特征物理常数。对于特定反应,要根据实验结果确定酶催化反应的最适温度作为反应的温度条件。 (2)温度对反应速度的作用 a)温度提高,反应速度增加; 一般化学反应,温度提高10℃,反应速度提高约1倍(Arrhenius公式),称为温度系数(Vt+10℃/Vt)。酶反应速度温度系数约1.4-2.0,略低于一般无机催化化反应和非催化反应。 (2)温度对反应速度的作用 b)温度提高,蛋白质变性,酶失活,反应速度下降。 4.pH值对酶催化反应速度的影响 pH值对活力的影响主要是因为pH值改变底物和酶分子的带电状态。 (1)pH值改变底物的带电状态 当底物为蛋白质、肽、氨基酸等两性电解质时,随pH值变化表现为不同的解离状态(带正电荷、负电荷或不带电荷-等电点)。但酶的活性部位通常仅能与一种电荷状态的底物结合。 (2)pH值改变酶分子的带电状态 酶的化学本质是蛋白质,故具有两性解离特性,pH值的改变导致酶活性部位有关基团的解离状态改变,从而影响酶与底物结合。不同的酶最适pH值不同,如蔗糖酶只有在等电点时才具有催化能力,在偏酸或偏碱行溶液中都会失活。 5.酶促反应过程的其它影响因素 (1)激活剂: 许多酶促反应必须在其它适当物质存在时才能表现酶的催化活性或加强其催化效力。这种作用称为酶的激活作用。引发激活作用的物质称为激活剂。激活剂与辅酶或辅基作用不同,前者不存在时,酶仍能表现一定催化活性,而后者不存在时,酶完全不具备催化能力。 (2)抑制剂: 酶在不变性的情况下,由于必需基团或活性中心化学性质的改变而引起的酶活性的降低或丧失,称为抑制作用(inhibit
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