银耳菌种的制作银耳菌种的制作.doc

银耳菌种的制作 2012年8月14日 来源：中国食用菌商务网 字号[ 大 中 小 ] 母种、原种的制作 　　把分离提纯后的银耳菌丝和香灰菌丝单独分开培养于试管中（详细的分离方法请浏览：银耳菌种的分离技术一文）。生产母种时，先取出银耳菌丝，并扩大到所需要的管数。然后放在25℃培养到银耳菌落直径约lcm左右。此时，再在每支长了银耳菌丝的试管中，接种极少量香灰菌丝，待两者长在一起时，就可以出售或用于原种生产了。　　如先接香灰菌丝，因香灰菌丝生长快，很快覆盖斜面，并很快消耗养料，其后接上的银耳菌丝就不易生长。 　　若香灰菌丝和银耳菌丝同时接种在一支试管中，同样会出现银耳菌丝少、香灰菌丝数量多的缺陷。 　　因此，生产银耳母种（试管种）时一定要注意接种的先后，以及注意控制两者的比例。 　　制作银耳菌种有必要了解银耳及其“伴生菌”香灰菌丝的关系： 　　在可以人工种植的食药用中，属于这种类型的菌目前仅有银耳和金耳。它们子实体的形成，银耳除了要有纯银耳菌丝外，还必须有“伴生菌”即香灰菌的帮助；金耳除了要有纯金耳菌丝外，还必须有粗毛硬革菌的帮助，两者缺一不可。在一般条件下，银耳和金耳的纯菌丝体生长相当缓慢，分解木质素、纤维素能力极弱，分别要依赖于香灰菌丝和粗毛硬革菌丝分解基质，提供它们生长发育所需的养分，否则便不可能形成子实体。所以在扩繁银耳、金耳母种时，必须将两种相应的菌丝体，移接在同一培养基上进行混合培养。现以银耳为实例介绍两种菌丝混合制种技术： 　　1、斜面母种混接法 　　取纯银耳菌丝试管母种和新配制的PDA斜面试管各一支，连同接种器具一起放入接种室（箱）中，按无菌操作进行转接，即挑取米粒大小、带培养基菌种一块，移接于空白试管斜面培养基上，加棉塞后置22-24℃下恒温培养6-8天。当银耳菌丝长至似绣球状如黄豆大小时，再连同香灰母种一起移入接种室（箱）里，按无菌操作用接种铲在距银耳纯菌丝团约2厘米处，接入一小块香灰菌丝母种，培养2天在接种块上便可见到白色菌丝，7天左右即形成白毛团而覆盖银耳纯菌丝团，12-15天在白毛团的上方可见到有红、黄色水珠即为成功。 　　需要指出，用银耳与香灰菌的斜面混合母种扩接原种时，应切去斜面的前后端，只取其绣球状的银耳纯白菌丝及附近黑灰色的香灰菌丝用于转接。因此1支斜面母种只能接1瓶原种。 　　2、瓶装木屑原种混接法 　　如果没有银耳纯菌丝，将银耳孢子培养出芽孢母种，再接入瓶装木屑培养基制成的香灰菌母种，混合培养而成。 　　根据接种需要量，按1支香灰斜面母种扩接12-15瓶木屑培养基的比例，将香灰菌母种试管和经灭菌的瓶装木屑培养基，以及接种用的器具，一起放入接种箱里，按无菌操作，用接种铲挑取黄豆大小的香灰菌母种一块，接入木屑培养基瓶中。接种完毕，移至24-26℃下培养，约经2天即可见到接种块上萌发白色菌丝。此后要隔天检查，发现杂菌及时检出剔除。一般培养11天左右，香灰菌丝可向培养基内延伸约3厘米，此时可观察到培养基表面有灰褐色或黑褐色的分泌物，这表明香灰菌丝生长旺盛，应及时接入银耳芽孢母种。 　　按1：12－15的比例，取银耳芽孢母种试管和培养好的木屑培养基香灰菌母种；一起放入接种室（箱）中，按无菌操作，用无菌接种刀划破香灰菌丝表层，再用无菌接种铲挑取少量银耳芽孢，接入香灰菌丝体中。混合后将瓶移至23-25℃下培养，经10天左右即可见到银耳芽孢接种处生长浓白色菌丝。再培养18天左右即出现红、黄色水珠，25天左右便可观察到有扭结状子实体原基，说明培养成功。1瓶这样的木屑混合种可扩接30-40瓶原种（二级种）。 　　栽培种的生产 　　根据原种生长的好坏，耳基大小，银耳菌丝“吃料”的深度，来决定每瓶原种应扩接的瓶数。为了保证质量，尽量控制在40-60瓶之内。如果原种能搅拌得很均匀，使银耳菌丝和香灰菌丝混合得很均匀，每瓶原种也可能接100-200瓶种植种。 　　注意事项 　　要生产出优良的银耳菌种，除了注意上述的各项要求，如无菌操作之外，还必须注意如下几个方面： 　　1.　生物专一性 　　银耳菌丝和香灰菌丝配合也有专一性。因此，为了生产有效的银耳菌种，我们必须从同一块耳木上分别获得银耳的纯培养（包括酵母状分生孢子或银耳菌丝）和纯的香灰菌丝。不同地区或同一地区不同耳木（树种）上得来的银耳菌丝和香灰菌丝不能随便调换，随意组合。否则，就有造成衰败的可能性。经调换和组合的效果，必须根据银耳菌丝在木屑培养基中定植的情况，以及耳基形成的大小，开片的情况来判断。凡是银耳菌丝能继续生长，形成耳基和顺利开片的，便可以继续扩大并用于生产，否则就不能使用。 　　2.　接种比例 　　根据银耳菌丝生长较慢，香灰菌丝生长很快这一个特点，在纯的混合培养时，必须注意银耳菌丝和香灰菌丝的接种比例。为了达到控制两者的接种比例，采用先培养